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            賽爾瑞成(北京)生命科學(xué)技術(shù)有限公司

            中級(jí)會(huì)員·8年

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            中級(jí)會(huì)員·8年
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            對(duì)于重組人GDF3檢測(cè)流程你是否清楚

            2022-1-20  閱讀(400)

            分享:
              重組人GDF3試劑盒具有的三種特性:
              靈敏度:最小的GDF-3 檢測(cè)濃度小于30pg/ml。特異性:可同時(shí)檢測(cè)重組或天然的人GDF-3。不與人其它細(xì)胞因子有交叉反應(yīng)。重復(fù)性:板內(nèi)、板見(jiàn)變異系數(shù)均小于10%。
              重組人GDF3其要求有哪些:
              1. 生物活性:進(jìn)行相應(yīng)的體外或體內(nèi)活性檢測(cè)。
              2. 純度:應(yīng)用兩種方法分析產(chǎn)品純度。
              3. 真實(shí)性:重組蛋白產(chǎn)品一致經(jīng)過(guò)N末端氨基酸序列分析;必要時(shí)應(yīng)用SDS-PAGE, RP-HPLC和質(zhì)譜(MS)檢測(cè)其真實(shí)性。
              4. 內(nèi)毒素:kinetic LAL法檢測(cè)內(nèi)毒素。
              5. 蛋白含量:通過(guò)紫外光譜分析,電泳檢測(cè);必要時(shí)應(yīng)用HPLC定量標(biāo)準(zhǔn)蛋白溶液。
              6. 微生物:重組蛋白在裝瓶之前都經(jīng)過(guò)濾除菌處理。
              重組人GDF3檢測(cè)流程:
              1. 加樣:每孔各加入標(biāo)準(zhǔn)品或待測(cè)樣品100ul,將反應(yīng)板充分混勻后置37℃120分鐘。
              2. 洗板:用洗滌液將反應(yīng)板充分洗滌4-6次,向?yàn)V紙上印干。
              3. 每孔中加入第一抗體工作液100ul。將反應(yīng)板充分混勻后置37℃60分鐘。
              4. 洗板:同前。
              5. 每孔加酶標(biāo)抗體工作液100ul。將反應(yīng)板置37℃30分鐘。
              6. 洗板:同前。
              7. 每孔加入底物工作液100ul,置37 ℃暗處反應(yīng)15分鐘。
              8. 每孔加入100ul終止液混勻。
              9. 30分鐘內(nèi)用酶標(biāo)儀在450nm處測(cè)吸光值。

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