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            人主要組織相容性復(fù)合體Ⅰ類熒光定量檢測試劑盒說明書

            閱讀:853          發(fā)布時(shí)間:2021-5-18
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                                       人主要組織相容性復(fù)合體Ⅰ類熒光定量檢測試劑盒說明書

            1、試劑盒簡介貨為了適應(yīng)人主要組織相容性復(fù)合體Ⅰ類熒光定量檢測試劑盒快速檢測和疫病研究的需要,本公司參照 OIE 國際標(biāo)準(zhǔn)中規(guī)定的引物序列,經(jīng)多次實(shí)驗(yàn)及系統(tǒng)優(yōu)化,開發(fā)了本試劑盒。應(yīng)用本試劑盒進(jìn)行檢測具有快速、靈敏、特異、準(zhǔn)確、安全操作簡單、應(yīng)用廣泛和高通量檢測等特點(diǎn)及優(yōu)點(diǎn)。2、試劑盒組成:
            試劑盒組成包括核酸提取試劑和核酸擴(kuò)增試劑,具體組成參見表 1:s

                                                                表 1:試劑盒組成(50test/盒)

            組成成分

            體積

            樣品 DNA 提  1

            樣品 DNA 提  2

            5ml×1 管

            500µl×1 管

            核酸擴(kuò)增試劑: DEPC 水

            BP PCR 反應(yīng)液

            Taq 酶(5U/ul) 陰性對照

            BP 陽性對照

            5ml×1 管

            750µl×1 管

            40µl×1 管

            1ml×1 管

            1ml×1 管

            人主要組織相容性復(fù)合體Ⅰ類熒光定量檢測試劑盒操作流程:

            1.從室溫平衡20min后的鋁箔袋中取出所需板條,剩余板條用自封袋密封放回4℃。

            2.設(shè)置標(biāo)準(zhǔn)品孔和樣本孔,標(biāo)準(zhǔn)品孔各加不同濃度的標(biāo)準(zhǔn)品50μL;

            3.樣本孔中加入待測樣本50μL;空白孔不加。

            4.除空白孔外,標(biāo)準(zhǔn)品孔和樣本孔中每孔加入辣根過氧化物酶(HRP)標(biāo)記的檢測抗體100μL,用封板膜封住反應(yīng)孔,37℃水浴鍋或恒溫箱溫育60min。

            5.棄去液體,吸水紙上拍干,每孔加滿洗滌液(350μL),靜置1min,甩去洗滌液,吸水紙上拍干,如此重復(fù)洗板5次(也可用洗板機(jī)洗板)。

            6.每孔加入底物A、B各50μL,37℃避光孵育15min。

            7.每孔加入終止液50μL,15min內(nèi),在450nm波長處測定各孔的OD值。

            樣本:血清 血漿 組織勻漿等液體樣本
             
            標(biāo)記物:血清 血漿 組織勻漿等
             
            應(yīng)用:僅用科研實(shí)驗(yàn)檢測定量,定性檢
             
            檢測方法:夾心法
             
            技術(shù)要求:全程按說明書步驟檢測,操作規(guī)范,專業(yè),儀器設(shè)備齊全。

            規(guī)格:48t/96t 

            性狀:液體 

            運(yùn)輸方式:快遞發(fā)貨 

            有效期:6個(gè)月品

            特點(diǎn):靈敏性高,---性,吸附均勻,吸附性好,回收利用率高,是一款可以讓您放心選購的產(chǎn)品。

            使用范圍:此產(chǎn)品供科研實(shí)驗(yàn)使用,不得用于---。

            用途:用于測定人血清、血漿、組織及相關(guān)液體樣本中的含量或活性。

            人主要組織相容性復(fù)合體Ⅰ類熒光定量檢測試劑盒注意事項(xiàng):

            1. 試劑盒從冷藏環(huán)境中取出應(yīng)在室溫平衡15-30分鐘后方可使用,酶標(biāo)包被板開封后如未用完,板條應(yīng)裝入密封袋中保存。濃洗滌液可能會(huì)有結(jié)晶析出,稀釋時(shí)可在水浴中加溫助溶,洗滌時(shí)不影響結(jié)果。

            2.各步加樣均應(yīng)使用加樣器,并經(jīng)常校對其準(zhǔn)確性,以避免試驗(yàn)誤差。一次加樣時(shí)間最好控制在5分鐘內(nèi),如標(biāo)本數(shù)量多,推薦使用排槍加樣。

            3.請每次測定的同時(shí)做標(biāo)準(zhǔn)曲線,最好做復(fù)孔。如標(biāo)本中待測物質(zhì)含量過高(樣本OD值大于標(biāo)準(zhǔn)品孔di一孔的OD值),請先用樣品稀釋液稀釋一定倍數(shù)(n倍)后再測定,計(jì)算時(shí)請最后乘以總稀釋倍數(shù)(×n×5)。

            4.封板膜只限一次性使用,以避免交叉污染。

            5.底物請避光保存。

            6.嚴(yán)格按照說明書的操作進(jìn)行,試驗(yàn)結(jié)果判定必須以酶標(biāo)儀讀數(shù)為準(zhǔn).

            7.所有樣品,洗滌液和各種廢棄物都應(yīng)按傳染物處理。

            8.本試劑不同批號組分不得混用。

            9.不能使用過期產(chǎn)品。
            10. 如與英文說明書有異,以英文說明書為準(zhǔn)。 

            每個(gè)樣品測試反應(yīng)體系配制見下表 2。

                                                表 2 每個(gè)樣品測試反應(yīng)體系配制表

            試劑

            PCR 反應(yīng)液

            Taq 酶

            合計(jì)

            用量

            14.5 μL

            0.5μL

            15μL

            人主要組織相容性復(fù)合體Ⅰ類熒光定量檢測試劑盒試劑盒組成及試劑配制:
            1.  酶聯(lián)板(Assay plate ):一塊(96孔)。 
            2. 標(biāo)準(zhǔn)品(Standard):2瓶(凍干品)。
            3. 樣品稀釋液(Sample Diluent):1×20ml/瓶
            4. 生物素標(biāo)記抗體稀釋液(Biotin-antibody Diluent):1×10ml/瓶。
            5. 辣根過氧化物酶標(biāo)記親和素稀釋液 (HRP-avidin Diluent):1×10ml/瓶。
            6. 生物素標(biāo)記抗體(Biotin-antibody):1×120μl/瓶(1:100)
            7. 辣根過氧化物酶標(biāo)記親和素(HRP-avidin):1×120μl/瓶(1:100)
            8. 底物溶液(TMB Substrate):1×10ml/瓶。 
            9. 濃洗滌液(Wash Buffer):1×20ml/瓶,使用時(shí)每瓶用蒸餾水稀釋25倍。 
            10. 終止液(Stop Solution):1×10ml/瓶(2N H2SO4)。

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