兔子神經營養因子3(NT-3)ELISA試劑盒實驗使用說明書

　　兔子神經營養因子3(NT-3)ELISA試劑盒實驗使用說明書本生一直視質量控制為企業的生命，追求企業競爭力的不斷提升。公司在經營中始終秉承：遵紀守法，嚴于律己，寬仁以待，敢于承擔的企業精神作為標準，以過硬的質量和優良的服務來維護和拓展市場，較大限度的滿足客戶的需求。與客戶的共贏，是我們的發展目標，本生，您信任的合作伙伴！本生試劑盒

　　兔子神經營養因子3(NT-3)ELISA試劑盒

　　中文名稱：兔子神經營養因子3(NT-3)ELISA試劑盒

　　英文名稱：rabbitneurotrophin3,NT-3ELISAKit

　　貨號：BS-4164

　　規格：48T/96T

　　品牌：BUNSEN

　　儲存溫度：：-20℃(較長時間不用時);2-8℃(頻繁使用時)

　　有效期：6個月

　　ELISA各種樣本收集、處理、保存方法

　　1.血清標本收集、處理、保存方法：

　　用無熱原、無內毒素的試管或離心管采集血液標本，全血標本室溫放置1-2h或4℃過夜，然后4℃、3000rpm/min離心20min，小心收集上清。置于-20℃(1-2周)或-80℃保存(較長時間)，避免反復凍融。避免使用溶血或高血脂的標本。

　　2.血漿標本收集、處理、保存方法：

　　根據樣本要求選擇EDTA或肝素鈉或枸緣酸鈉作為抗凝劑，用含抗凝劑的采血管或離心管采集血液標本，室溫混合20min左右，然后4℃、3000rpm/min離心20min，小心收集上清即為血漿。置于-20℃(1-2周)或-80℃保存(較長時間)，避免反復凍融。避免使用溶血或高血脂的標本。

　　3.尿液標本收集、處理、保存方法：

　　用干凈容器收集尿液，4℃、3000rpm/min離心20min，小心收集上清。置于-20℃(1-2周)或-80℃保存(較長時間)，避免反復凍融。

　　4.唾液標本收集、處理、保存方法：

　　用干凈離心管收集唾液，4℃、3000rpm/min離心20min，小心收集上清。置于-20℃(1-2周)或-80℃保存(較長時間)，避免反復凍融。

　　5.細胞標本收集、處理、保存方法:

　　(1)細胞培養上清

　　取細胞培養上清到干凈離心管中，4℃、3000rpm/min離心20min，小心收集上清。置于-20℃(1-2周)或-80℃保存(較長時間)，避免反復凍融。

　　(2)細胞裂解液

　　收集細胞培養液，4℃、3000rpm/min離心20min，棄去上清，用預冷的PBS(0.01M，PH7.4)洗滌三次。加入適量的預冷PBS或細胞裂解液(臨用前加入蛋白酶抑制劑)重懸細胞。通過反復凍融，使細胞充分裂解。然后4℃、10000rpm/min離心20min，除去細胞碎片，取上清。置于-20℃(1-2周)或-80℃保存(較長時間)，避免反復凍融。

　　6.植物標本收集、處理、保存方法：

　　取適量大小組織塊(一般0.2-0.5g)，用預冷的PBS緩沖液(0.01M，PH7.4)漂洗三次，濾紙拭干水分。準確稱重，放入勻漿管中，加入4倍體積的勻漿介質(0.05mol/LTris-HCl，pH7.4PBS緩沖液)于勻漿管中，冰水浴條件下，剪碎組織塊，手工勻漿或機器勻漿，制成勻漿液。4℃、10000rpm/min離心20min，取上清。置于-20℃(1-2周)或-80℃保存(較長時間)，避免反復凍融。

　　7.糞便標本收集、處理、保存方法：

　　采集時用干凈的竹簽挑取糞便樣本到離心管中，向離心管中加入適量PBS緩沖液(0.01M，PH7.4)，攪拌均勻。然后4℃、10000rpm/min離心20min，小心收集上清。置于-20℃(1-2周)或-80℃保存(較長時間)，避免反復凍融。

　　8.組織標本收集、處理、保存方法：

　　將組織樣本用PBS緩沖液(0.01M，PH7.4)沖洗，洗去組織表面殘留的血液或雜質。將組織塊稱重，記錄后剪碎(碎塊盡量小)。將組織按一定的比例(通常組織重量：PBS體積=1：9)加入預冷的PBS緩沖液(臨用前加入蛋白酶抑制劑)中勻漿，勻漿時置于冰上。吸取勻漿液到離心管中，4℃、10000rpm/min離心20min，小心收集上清。置于-20℃(1-2周)或-80℃保存(較長時間)，避免反復凍融。

　　兔子神經營養因子3(NT-3)ELISA試劑盒

　　1.ELISA試劑盒從冷藏環境中取出應在室溫平衡15-30分鐘后方可使用，酶標包被板開封后如未用完，板條應裝入密封袋中保存。

　　2.濃洗滌液可能會有結晶析出，稀釋時可在水浴中加溫助溶，洗滌時不影響結果。

　　3.各步加樣均應使用加樣器，并經常校對其準確性，以避免試驗誤差。一次加樣時間最好控制在5分鐘內，如標本數量多，推薦使用排槍加樣。

　　4.請每次測定的同時做標準曲線，最好做復孔。如標本中待測物質含量過高(樣本OD值大于標準品孔第一孔的OD值)，請先用樣品稀釋液稀釋一定倍數(n倍)后再測定，計算時請最后乘以總稀釋倍數(×n×5)。

　　5.封板膜只限一次性使用，以避免交叉污染。

　　6.底物請避光保存。

　　試劑盒靈敏度、精密度、穩定性

　　1.靈敏度：有二層含義，1)為試劑檢出被檢物質的量的能力;2)為試劑對大量樣品中陽性檢出的能力。2.特異性：常用交叉反應率表示。其越高說明特異性越好。

　　3.精密度：ELISA試劑一般指其批內CV，其值應小于15%;定量試劑應同時考察線性范圍

　　4.穩定性：試劑在規定條件下能儲存的時間，一般采用破壞性試驗即將試劑存放于37℃保存，定期測定其靈敏度，特異性和精密度等指標，直到其質量指標開始下降為止，通常認為37℃每穩定一天相當于4-10℃保存一個半月。

　　5.簡便性：指在不影響試劑的前三項指標的前題下，實驗和測定步驟越少越好，在定性試驗中結果判斷簡單明了，定量試驗結果計算也應簡單。

　　6.安全性：指試劑對操作者和環境安全無害無傳染性。

　　7.經濟性：試劑在同等質量條件下通過大規模生產或技術進步降低成本而市場價格比較合理。