小鼠β淀粉樣蛋白1-42(Aβ1-42)ELISA試劑盒實(shí)驗(yàn)使用說(shuō)明書

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　　BS-2220  小鼠β淀粉樣蛋白1-42(Aβ1-42)ELISA試劑盒

　　一、實(shí)驗(yàn)原理

　　采用雙抗體夾心法ELISA技術(shù)。將抗Aβ1-42抗體預(yù)包被于微孔板，加入樣本和標(biāo)準(zhǔn)品后，與HRP標(biāo)記的檢測(cè)抗體形成復(fù)合物，經(jīng)TMB顯色后通過(guò)酶標(biāo)儀測(cè)定OD值，顏色深淺與Aβ1-42濃度呈正相關(guān)?12。

　　二、試劑盒組成

　　?主要組分?：

　　預(yù)包被微孔板(96T/48T)

　　標(biāo)準(zhǔn)品(濃度通常為160-400pg/mL)?24HRP標(biāo)記檢測(cè)抗體?3TMB顯色液及終止液?15濃縮洗滌液(需稀釋使用)?38?保存條件?：

　　未開封試劑盒：2-8℃保存，有效期6個(gè)月?14開封后：建議分裝凍存于-20℃(避免反復(fù)凍融)?46三、樣本處理

　　?血清/血漿?：

　　采集后需離心(1000×g，10-30分鐘)，分離上清?14避免溶血或脂血樣本?45?組織勻漿/細(xì)胞上清?：

　　離心去除沉淀后取上清檢測(cè)?46四、操作步驟

　　?標(biāo)準(zhǔn)品稀釋?：按說(shuō)明書梯度稀釋(通常為2-90pg/mL范圍)?25?加樣與孵育?：

　　每孔加入樣本或標(biāo)準(zhǔn)品100μL，37℃孵育1-2小時(shí)?13?洗滌?：使用稀釋后的洗滌液洗板3-5次?38?顯色與終止?：

　　加入TMB顯色10-15分鐘，終止液終止反應(yīng)?15?檢測(cè)?：

　　450nm波長(zhǎng)讀取OD值，繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線計(jì)算濃度?25五、注意事項(xiàng)

　　?質(zhì)量控制?：

　　板內(nèi)/板間變異系數(shù)應(yīng)<10%?5回收率建議在84-101%范圍內(nèi)?5?操作規(guī)范?：

　　避免使用金屬頭移液器接觸底物?3不同批號(hào)試劑不可混用?36六、結(jié)果判讀

　　典型標(biāo)準(zhǔn)曲線范圍：15.62-1000pg/mL，檢測(cè)限通常<31.25pg/mL?57。建議每次實(shí)驗(yàn)獨(dú)立建立標(biāo)準(zhǔn)曲線?5。

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