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            豬高密度脂蛋白(HDL)ELISA試劑盒實驗使用說明書

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              豬高密度脂蛋白(HDL)ELISA試劑盒實驗使用說明書

              BS-4707 豬高密度脂蛋白(HDL)ELISA試劑盒

              以下是豬高密度脂蛋白(HDL)ELISA試劑盒的實驗使用說明綜合整理:

              一、實驗原理

              采用雙抗體一步夾心法酶聯免疫吸附試驗(ELISA)。預先包被HDL捕獲抗體的微孔板中依次加入標本、標準品和HRP標記檢測抗體,經溫育洗滌后,通過TMB顯色反應(藍色→黃色)測定450nm吸光度,顏色深淺與HDL濃度呈正相關。

              二、樣本處理要求

              血清?:采集后1000×g離心10分鐘分離,避免溶血或脂血;

              血漿?:EDTA/肝素抗凝,1000×g離心30分鐘去除顆粒;

              組織勻漿?:需充分勻漿后離心取上清;

              保存?:2-8℃可存7天,長期需分裝于-20℃以下,避免反復凍融。

              三、試劑盒組成

              預包被微孔板

              HDL標準品(不同濃度)

              HRP標記檢測抗體

              TMB顯色底物、終止液

              洗滌緩沖液(20×濃縮需稀釋)

              四、操作步驟

              加樣?:

              標準品孔:梯度濃度各50μL;

              樣本孔:樣本40μL+稀釋液10μL(5倍稀釋);

              孵育?:37℃避光溫育60分鐘,封板膜密封;

              洗滌?:棄液后加洗滌液靜置30秒,重復5次,拍干;

              顯色?:每孔加TMB底物50μL,37℃避光顯色15分鐘;

              終止?:加終止液50μL,15分鐘內測定450nm OD值。

              五、注意事項

              試劑保存?:未使用板條需密封防潮,2-8℃保存;

              操作規范?:

              不同批號試劑勿混用;

              移液誤差需<2%,避免產生氣泡;

              顯色后顏色異常(如深藍色)需棄用;

              質量控制?:

              批內CV<10%,批間CV<12%;

              每批次實驗需同步標準曲線。

              六、結果計算

              以標準品濃度為橫坐標,OD值為縱坐標繪制曲線,通過樣本OD值計算濃度。

              注:本試劑盒僅限科研使用,不可用于臨床診斷,以上資料僅供參考,具體請咨詢技術老師。

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