Bst DNA 聚合酶（大片段）
用于 DNA 測序高 GC 區域以及納克量 DNA 模板的快速測序。
描述：
Bst DNA 聚合酶，大片段是嗜熱脂肪芽孢桿菌 DNA 聚合酶蛋白的一部分，包含 5′ → 3′ 聚合酶活性，但缺乏 5′ →3′ 核酸外切酶活性。
酶提供強大的鏈置換活性。最佳溫度為 60-65 ?C。Bst 在 80 ?C 時熱失活。Bst 聚合酶大片段由含有嗜熱脂肪芽孢桿菌 DNA 聚合酶基因的大腸桿菌菌株制備，缺乏 5′ → 3′ 核酸外切酶結構域。
Bst DNA 聚合酶大片段提供三種濃度：8,000 U/ml、50,000 U/ml 和 400U/ml，保存緩沖液為 10 mM Tris-HCl，pH 7.5、50 mM KCl、1 mM DTT、0.1 mM EDTA 、0.1% Triton X-100 和 50% 甘油。高濃度 (400U/ml) 還提供無甘油緩沖液和凍干粉末。
圖：MCLAB Bst DNA 聚合酶（大片段）顯示出比其他兩個供應商的產品更高的鏈置換聚合酶活性。
應用：
- 核酸擴增方法，包括等溫擴增、LAMP
- 全基因組擴增 -
通過有問題的二級結構進行測序
使用 Bst DNA 聚合酶的典型 LAMP 方案
成分 | 最終濃度 | 25 µl 反應 |
Bst 的 10X 緩沖器 | 1X（不含MgSO4） | 2.5 微升 |
硫酸鎂 (100 mM) | 總計 8 mM | 2.0 微升 |
dNTP 混合物 (10 mM) | 每個 1.4 mM | 3.5 微升 |
FIP/BIP 底漆 (10X) | 1.6微米 | 1微升 |
F3/B3 底漆 (10X) | 0.2微米 | 1微升 |
LoopF/B 引物 (10X) | 0.8微米 | 1微升 |
Bst 大片段 (8,000 U/ml) | 80-320 U/毫升 | 0.95-1.1 微升 |
DNA樣本 | > 10份或以上 | 不適用 |
無核酸酶水 | 最多 25 µl | |
總反應體積 | 25微升 |
比活度： 120,000 U/mg
提供于：
10 mM Tris-HCl
50 mM KCl
1.0 mM DTT
0.1 mM EDTA
0.1% Triton X-100
50% 甘油
pH 7.5 @ 25°C
提供于：
10X PCR 緩沖液 II
10x PCR 緩沖液 II ：
200 mM Tris-HCl
100 mM 硫酸銨
100 mM KCl
20 mM MgSO 4
1.0% Triton X-100
pH 8.8 @ 25°C
單位定義：
1 單位定義為將 10 nmol dNTP 轉化為酸所需的聚合酶量65°C 30 分鐘內不溶物質。
推薦儲存條件： -20°C
注意：
- 建議長期儲存：0.1% Triton X-100
- 不建議反應溫度高于 70°C。
- Bst DNA 聚合酶不能用于熱循環測序。
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上海牧榮生物科技有限公司 | 下載次數 |
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