普通pcr和熒光定量pcr的區(qū)別

PCR儀也被稱做“基因擴增儀"是核酸檢測、PCR實驗、qpcr實驗常用的儀器設備，根據(jù) PCR實驗方法主要分為以下幾種：普通PCR儀、梯度PCR儀、 熒光定量PCR儀 、快速PCR儀、原位PCR儀等。

一、普通PCR儀

普通PCR是指在PCR 過程中指設定一個退火溫度參數(shù)，進行樣本的PCR擴增。

這種PCR儀往往屬于單通道模式，單一的參數(shù)設定，會影響到實驗效率，所以比較適宜用在檢測量較小，實驗任務量不大的小規(guī)模PCR擴增實驗室。比如學校實驗室，科研機構實驗室，檢測實驗室等。

二、梯度PCR儀

梯度PCR采用多通道模式，是在同一臺PCR 儀器中可以設置不同的溫度梯度和退火溫度進行擴增循環(huán)，從而可以快速篩選出較佳退火溫度的通道單獨進行擴增的PCR 儀，從而減少PCR實驗中的循環(huán)次數(shù)節(jié)約PCR擴增時間，所以有的梯度PCR儀也被稱為快速 PCR儀。梯度PCR儀多用于檢疫檢測、科研實驗室、臨床檢測、生命科學實驗室等機構。

三、實時熒光定量PCR儀

熒光定量PCR儀不僅可以進行PCR擴增，還可以進行熒光信號采集并連接到計算機中進行熒光定量分析，它可以實時監(jiān)測與 DNA結合的熒光染料激發(fā)狀態(tài)。而普通PCR檢測儀則是通過檢測插入DNA中核酸 染料量來測定PCR最終產物量的熒光。但是熒光定量PCR不太適合擴增較長片段的對于，熒光定量PCR 儀比較適合擴增的DNA片段長度在100-300bp為宜。有的熒光定量PCR儀為提升檢測效率，會采用雙通道或多通道設計，這樣可以實現(xiàn)同時測定不同熒光標記的樣本，有效解決了 PCR 工作的重復性與復雜性。比如朗基系列Q2000系列實時熒光定量PCR儀，主要應用于臨床檢測、核酸檢測、醫(yī)藥科技、科研等機。

四、原位PCR儀

這種PCR儀可以直接在取樣的細胞或組織樣本上進行基因擴增，儀器通過原位檢測技術和擴增數(shù)據(jù)分析并可用于直接檢測病原體，有效提高檢出率，甚至可以觀測到病原體在生物體內的分布規(guī)律。原位PCR儀往往具備熒光定量 PCR儀、普通PCR的特征，在病理研究和科研機構方面應用較多。

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