使用實驗室儀器進行小鼠抗體生產技術

小鼠抗體是科研實驗中常用的一種抗體，它主要有IgA、IgD、IgE、IgG 和 IgM五種類型，下面小編就小鼠抗體分類及使用實驗室儀器進行小鼠抗體生產技術做一下簡單介紹：

小鼠抗體同種型/類、亞類和小鼠抗體同種型

與人類相同，小鼠有五種抗體同種型（IgA、IgD、IgE、IgG 和 IgM）。每個同種型都有不同的重鏈。同種型也稱為類。抗體的另一個名稱是免疫球蛋白，因此后綴“Ig"表示抗體類別和亞類。幼稚 B 細胞產生 IgM 和 IgD。在 B 細胞成熟過程中，通過同種型轉換，成熟的 B 細胞將產生 IgG、IgA 或 IgE 同種型和亞類中的一種。不同的同種型在體內具有不同的半衰期，從 12 小時到 8 天不等 。

小鼠同種型基因

每條重鏈由可變區和恒定區組成。恒定區為不同的基因，盡管它們僅構成免疫球蛋白重鏈的一部分。
對于 IgG2a 和 IgG2c 同種型：具有 Igh1-b 等位基因的近交小鼠品系具有 IgG2c 同種型，而不是 IgG2a 。除其他同種型外，鼠類重鏈基因座僅具有這兩種同種型基因中的一種。小鼠 IgG2a 支架有時用于重組抗體表達。
表 1 列出了小鼠抗體類別、子類、基因名稱以及 NCBI 和 IMGT 基因數據庫的鏈接。

表 2 列出了實驗室中一些常用動物物種的不同同種型和亞類基因組。IgG2a 在某些小鼠品系中不存在，例如 C57BL、SJL 和 NOD 小鼠，它們具有 IgG2c。

小鼠抗體分子量
IgA、IgD 和 IgG 的重鏈具有一個具有三個免疫球蛋白 (Ig) 結構域的恒定區。例如小鼠IgA重鏈恒定區有344個氨基酸，小鼠IgG1恒定區有324個氨基酸。其他類型的重鏈可能具有不同數量的免疫球蛋白結構域。例如，分泌型和膜結合型 IgD 重鏈恒定區有兩個 Ig 結構域。IgE 和 IgM 的重鏈有一個帶有四個免疫球蛋白結構域的恒定區。小鼠 IgM 重鏈恒定區有 475 個氨基酸。來自所有同種型的重鏈都有一個帶有單個免疫球蛋白結構域的可變區。
      每個免疫球蛋白結構域長約 110 個氨基酸。每條IgD和IgG重鏈約450個氨基酸，每條IgE和IgM重鏈約550個氨基酸。每條輕鏈（kappa 或 lambda）都有一個恒定的免疫球蛋白結構域和一個可變的免疫球蛋白結構域，大約有 211 到 217 個氨基酸。常見的 IgG 同種型的分子量為 150 KD。在還原條件下，每條重鏈約為50 KD，每條輕鏈約為25 KD。IgM 往往以五聚體或六聚體形式存在，其中 IgM 分子通過二硫鍵共價連接，從而產生 970 KD 的分子量。由于免疫球蛋白是糖基化的，因此表觀分子量可能與標稱分子量不同，有時甚至區別較大。
小鼠抗體生產
    小鼠是單克隆抗體產生的主要動物宿主，也是多克隆抗體產生的宿主。小鼠單克隆抗體生產也會涉及到實驗室儀器、實驗耗材及一些科研試劑。比如：用外源抗原以及常用的弗氏佐劑或新型水溶性 QuickAntibody對小鼠（通常是BALB/c小鼠， 進行免疫。小鼠單克隆抗體也可以通過將來自特定小鼠品系的未免疫脾細胞與自身抗體融合直接獲得，如抗 SM Y12 抗體的情況。其他菌株，如 C57BL/6 、NMRI、C3H 和 SJL，以及其他佐劑如殼聚糖、LQ 或弗氏佐劑，以及過表達免疫原的埃文細胞，也可以使用。基因工程小鼠品系也可以作為宿主開發特異性抗體，例如通過β3Gn-T5基因敲除小鼠開發了一種對GM3神經節苷脂具有高結合特異性的IgG單克隆抗體。
      截至2022年6月5日，科研數據庫列出了針對12039個人類基因、7144個小鼠基因、6475個大鼠基因以及來自其他156個物種的11079個基因的254742個小鼠單克隆抗體。
    大多數單克隆抗體是在小鼠體內產生的。通常使用抗小鼠二抗。 二抗多數為山羊抗小鼠。
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