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            核酸電泳分析方法比較

            時間:2024/4/28閱讀:996
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                  凝膠電泳仍然是核酸分離和分析的既定方法。然而,許多使用預制凝膠和標準化試劑的自動化系統現在非常流行。這種方法在有大量樣品或需要高通量分析的情況下特別有用。此外,還開發了安捷倫生物分析儀等系統,無需制備電泳凝膠。它們采用在包含互連微儲器的小型盒單元上構建的微流體電路。將樣品涂在一個區域,并在計算機控制的電泳下驅動通過微通道。這些通道通向儲液器,例如允許與其他試劑(例如染料)一起孵育的時間。因此,電泳分離以微米級形式進行。小樣本量減少了樣本和試劑的消耗,并且由計算機控制的裝置允許在很短的時間內捕獲數據。

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               此外,專用分光光度計(例如 ThermoFisher Scientific NanoDrop 系統)可以在有限的樣品量下快速提供核酸濃度。替代分析方法,包括基于高效液相色譜的方法,已經越來越受歡迎,尤其是 DNA 突變分析。傳統上用于蛋白質分析的質譜方法,例如基質輔助激光解吸/電離 (MALDI-TOF),由于其速度快且可靠性不斷提高,也越來越多地用于核酸分析。小樣本量最大限度地減少了樣本和試劑的消耗,并且由計算機控制的裝置允許在很短的時間內捕獲數據。此外,專用分光光度計(例如 ThermoFisher Scientific NanoDrop 系統)可以在有限的樣品量下快速提供核酸濃度。

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               替代分析方法,包括基于高效液相色譜的方法,已經越來越受歡迎,尤其是 DNA 突變分析。傳統上用于蛋白質分析的質譜方法,例如基質輔助激光解吸/電離 (MALDI-TOF),由于其速度快且可靠性不斷提高,也越來越多地用于核酸分析。

            單細胞DNA分析

                單細胞 DNA 分析也是近年來許多研究的焦點。熒光激活細胞分選(FACS)、激光捕獲顯微切割(LCM)和微流體分析等技術極大地提高了這些細胞的分析能力。最近已經采用了許多商業方法,一個例子是 10x Genomics 開發的工藝。這使得一種有趣且新穎的自動化過程成為可能,稱為 10x Chromium,可以使用 Illumina HiSeq 系統通過測序來制備、條形碼化和分析來自數千個細胞的核酸,以進行單細胞基因表達譜和表征(參見第 1.8.6 節)。諸如此類的新流程提供了有效的方法來對健康和患病狀態下的細胞和組織進行有效的進一步分析。

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