CHO細胞轉瓶后長勢不好原因分析及解決方案

在生物制藥領域，CHO（中國倉鼠卵巢）細胞是常用的宿主細胞，用于生產重組蛋白藥物。然而，在CHO細胞的培養過程中，有時會遇到細胞轉瓶后長勢不佳的問題。這種情況可能會影響藥物的生產效率和產品質量。本文將分析可能導致 CHO細胞轉瓶后長勢不佳的原因，并提出相應的解決方案。

CHO細胞轉瓶后長勢不好的原因主要有以下幾點：

1.環境變化：細胞在轉瓶過程中，可能會遇到溫度、濕度、氧氣和二氧化碳濃度等環境因素的變化。這些變化可能會對細胞的生長狀態產生影響。例如，溫度的波動可能導致細胞代謝途徑的改變，濕度的變化可能會影響細胞的滲透壓平衡，氧氣和二氧化碳濃度的波動可能會影響細胞的呼吸和酸堿平衡。因此，維持穩定的培養環境對于細胞的生長比較重要。

2.營養物質供應不足：轉瓶后，細胞可能會面臨營養物質供應不足的問題。尤其是葡萄糖、氨基酸和維生素等關鍵營養素的缺乏，可能會導致細胞能量供應不足，影響細胞的生長和代謝。因此，在轉瓶后，需要及時補充足夠的營養物質，以滿足細胞的生長需求。

3.代謝廢物積累：細胞代謝產生的廢物，如乳酸和氨，如果在轉瓶后不能及時清除，可能會對細胞生長產生不利影響。這些廢物積累過多會導致細胞內環境惡化，影響細胞的生長和生產力。因此，定期更換培養基，及時清除代謝廢物，可以使細胞維持良好的生長狀態。

4.細胞密度和競爭：轉瓶后，細胞密度可能會增加，導致細胞間的競爭加劇。過高的細胞密度可能會導致營養物質的消耗過快，代謝廢物的積累增多，以及細胞間的接觸抑制現象。這些因素都會影響細胞的生長和生產力。因此，在轉瓶前，需要控制細胞的密度，避免過高的細胞密度對生長產生不利影響。

5.無菌條件：轉瓶過程中的無菌操作不當可能會導致細胞污染。細胞污染會嚴重影響細胞的生長狀態，甚至導致細胞死亡。因此，在轉瓶過程中，需要嚴格遵守無菌操作規程，包括對培養器具的消毒、操作人員的無菌操作技術等，以防止細胞污染的發生。

轉瓶后細胞長勢弱的優化解決方案：

1. 優化培養環境：確保轉瓶后的培養環境（如溫度、濕度、氧氣和二氧化碳濃度）與原培養環境一致，減少環境變化對細胞的影響。

2. 調整培養基配方：根據細胞的營養需求，調整培養基中的營養成分，確保細胞在轉瓶后能夠獲得充足的營養供應。

3. 定期更換培養基：定期更換培養基，以清除代謝廢物，保持培養環境的穩定。

4. 控制細胞密度：在轉瓶前，控制細胞的密度，避免過高的細胞密度對生長產生不利影響。

5. 加強無菌操作：在轉瓶過程中，嚴格遵守無菌操作規程，防止細胞污染。

   此外，可以使用一些商業化的添加劑和設備來促進CHO細胞的生長，如使用InstiGRO、InstiSHAKE和InstiTHAW等促細胞生長劑。

- InstiGRO：這是一種促進CHO或HEK單細胞生長的添加劑，可以提高克隆效率，加速手動鋪板后細胞的生長。與Solentim VIPS系統結合使用，可以實現自動單細胞鋪板，從而提高細胞株開發的效率。

- InstiSHAKE：這是一種專為CHO或HEK細胞設計的振蕩培養補充劑，可以提高細胞活力，加速細胞生長，有助于生產更高密度的培養物，并在一系列培養基中提供批次間的一致性。

- InstiTHAW：這是一種用于冷凍保存細胞的添加劑，旨在保護CHO或HEK細胞在冷凍和解凍過程中的活力，確保細胞在冷凍保存后獲得理想的恢復率。

當CHO細胞在轉瓶后出現生長不良時，可以通過優化培養環境、調整培養基配方、定期更換培養基、控制細胞密度、加強無菌操作以及使用商業化添加劑和設備等方法來解決問題。通過這些措施，可以有效地改善CHO細胞的生長狀態，提高藥物生產的效率和產品質量。

蘇州阿爾法生物16年專注實驗室儀器設備、生物試劑、實驗耗材的供應商。所提供的細胞系開發設備主要包括：單細胞測序儀、納米粒度儀、單細胞鋪板驗證儀，活細胞成像儀，  iPSC基質膠，細胞生長因子等。