類器官培養(yǎng)試劑選擇請(qǐng)記住這三個(gè)黃金法則

各位科研伙伴，類器官培養(yǎng)試劑選擇記住三個(gè)黃金法則，2 分鐘掌握關(guān)鍵 ——

一、基質(zhì)膠：搭好三維 “腳手架"
 天然基質(zhì)（如 Matrigel）像真實(shí)細(xì)胞外基質(zhì)，選它看兩點(diǎn)：

 ? 硬度適配：腸類器官用軟基質(zhì)（濃度 1.2-2.4 mg/mL），肝類器官用中等硬度，別搞錯(cuò)！

 ? 批間穩(wěn)定：必須選低內(nèi)毒素（＜5 EU/mL）、無(wú)支原體的批次，到手先測(cè)成球率，1000 個(gè)細(xì)胞 72 小時(shí)成球＞80% 才合格。
 合成基質(zhì)（如 PEG 水凝膠）成分純、無(wú)動(dòng)物源，適合培養(yǎng)或研究基質(zhì)單獨(dú)作用。

二，培養(yǎng)基：配好營(yíng)養(yǎng) “信號(hào)餐"
 基礎(chǔ)培養(yǎng)基按器官選：腸胃用 MEM/NEAA，肝腎用 DMEM/F12，都要無(wú)酚紅、低糖版。
 關(guān)鍵生長(zhǎng)因子是靈魂：

? 腸肺類器官離不開 Wnt 激動(dòng)劑（R-spondin 1+Noggin），純度＞95% 才有效；

? 分化期加對(duì)應(yīng)因子，比如腎類器官加 BMP-7，胰腺類器官抑制 TGF-β，濃度隨階段調(diào)。
 傳代時(shí)加 Y-27632，24 小時(shí)內(nèi)提高貼壁存活率，新手可用！

 三，質(zhì)量控制：避開試劑 “雷區(qū)"

? 安全性：內(nèi)毒素＜1 EU/mL（高了類器官會(huì)發(fā)炎），無(wú)菌檢測(cè)做 14 天，支原體用 MycoAlert 快篩；

? 功能性：成球率＞80%，還要有典型結(jié)構(gòu)（比如腸類器官長(zhǎng)隱窩），測(cè)基因確保沒 “長(zhǎng)歪"；

? 批間穩(wěn)定：同一批試劑傳 10 代以上，別讓類器官越養(yǎng)越差。