一、培養基與染料

  培養基（Medium）是供微生物、植物和動物組織生長和維持用的人工配制的養料，一般都含有碳水化合物、含氮物質、無機鹽（包括微量元素）以及生長素和水等。有的培養基還含有染料、抗菌素、激素和血清等。不同的培養基需要添加的染料不同，常用的染料有中性紅、苯fen紅、溴jia酚紫、結晶紫、溴麝香草酚藍、品紅、伊紅、美蘭、孔雀綠等。經常見到有的人在配制培養基的過程中，其他成分都溶解了，最后加染料后，溶解不徹-底的情況，結果不得不重新配制，往往重復幾次依然找不到原因，既浪費了原料，又耽誤了時間，影響試驗的順利進行。本文主要就培養基中染料的溶解方式做簡單介紹，希望能給大家提供幫助。

 

二、染料的分類

  根據染料的溶解媒介，可以將常用染料大致分為3類：水溶性染料、醇溶性染料和堿溶性染料。顧名思義，水溶性染料就是指只用純水就能完-全溶解，形成透明溶液的染料；而醇溶性染料和堿溶性染料則需要分別在醇類或堿性介質中才能進行徹-底溶解，如果只用水是不能溶解的（如圖1）。生物實驗室常見的染料溶解特性相關內容，可參考

圖1-1 中性紅在水中的溶解狀態

圖1-2 苯fen紅在水和稀堿溶液中的溶解狀態

圖1-3 溴甲fen紫在水和乙醇中的溶解狀態

圖1 三種染料在不同溶劑中的溶解狀態

 

三、溶解介質對培養基的影響

  經常有人會質疑，如果培養基中加入了過多的非水溶劑（乙醇或堿液），是否會對培養基的性能造成影響，至少會引起培養基的pH值變化。

  首先，在配制染料溶液時，并不是全部的溶劑都用乙醇或堿液，通常只需滴加幾滴或幾毫升溶劑，讓染料充分溶解，分散開以后，再用純化水定容至所需容量就可以了。

  其次，培養基中染料的添加量是很少的，尤其是做成母液后使用，每升培養基中只需加幾毫升甚至更少，引入的乙醇或堿液很少。

  另外，乙醇不會引起培養基pH值變化，少量堿液就算會引起pH稍有影響，配制好了再微調一下就行了。正常配制培養基，也都要用稀酸或稀堿對pH進行調節的。

  綜合來看，少量非水溶劑對培養基本身造成的影響可以忽略不計。

 

四、具體操作

  下面以苯fen紅為例，詳細說明一下染料溶液的配制過程。

  （1）首先，查一下苯fen紅的特性：苯fen紅為鮮紅至深紅色結晶或細小結晶性粉末，在空氣中穩定；1g溶于約1300mL水，約350mL乙醇，500mL丙酮；易溶于氫氧hua鈉或碳酸鈉溶液中呈紅色，與鋅fen共沸褪色；幾乎不溶于yi醚和氯fang。

  經確認，該染料為堿溶性染料，準備好稀堿溶液（本實驗室通常用1mol/L的NaOH或Na₂CO₃）；

  （2）稱量所需染料至玻璃容器（錐形瓶或燒杯），如圖2-1；

圖2-1 容器中的染料

（3）滴入幾滴堿液，輕輕搖晃容器，直至染料均勻分散，無顆粒物，如圖2-2；

圖2-2 滴入堿液并搖晃后，染料的狀態

（4）用純化水定容至所需容積，搖勻即可備用，如圖2-3。

圖2-3 溶解好的染料溶液

 

五、補充說明

  實驗過程中常用的染料都可以用上面的方法進行溶液配制。有些染料本身是水溶性的，熱水中溶解度更高，可以稍稍加熱促進其溶解。但對于需要醇溶或堿溶的染料，如果只用水，即使加熱也達不到溶解的目的。所以首先要選對溶劑，這一點非常重要。如果濃度太大，有少量顆粒，還可以借助超聲儀進行溶解。

 

 

注:本文屬海博生物原創,未經允許不得轉載。