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            技術文章

            Todd-Hewitt瓊脂培養基原理和使用方法

            閱讀:360          發布時間:2025-2-27

            一、試驗原理:

              用于鏈球菌的分離培養。

              細菌蛋白胨、牛心浸粉提供氮源、碳源、維生素和生長因子;葡萄糖提供碳源;氯化鈉用于維持細胞滲透壓;碳酸鈉和磷酸氫二鈉提供無機鹽以及作為緩沖劑維持培養基的pH;瓊脂作為培養基的凝固劑。


            二、培養基配方(g/L):

            細菌蛋白胨

            20.0

            牛心浸粉

            3.1

            碳酸鈉

            2.5

            葡萄糖

            2.0

            氯化鈉

            2.0

            磷酸氫二鈉

            0.4

            瓊脂

            15.0

            pH值7.8±0.2(25℃)


            三、試驗方法:

              1. 稱取本品45.0 g,加熱溶解于1000 mL蒸餾水中,分裝,121℃高壓滅菌15分鐘,備用。

              2. 制備質控菌液;

              3. 選擇合適稀釋度的質控菌液100 μL,均勻涂布于待測培養基上,用TSA瓊脂做對照培養基,計算回收率;

              4. 放置36±1℃需氧培養24-48小時,記錄試驗結果。


            四、試驗結果判斷:

              接種以下質控菌株,放置于36±1℃需氧培養24-48小時。


            質控菌株

            菌株編號

            接種量

            (CFU)

            回收率

            生長情況

            其他特征

            溶血性鏈球菌

            CMCC(B) 32210

            10-100

            ≥70%

            +++

            白色小菌落

            糞鏈球菌

            ATCC 29212

            10-100

            ≥70%

            +++

            白色小菌落

            金黃色葡萄球菌

            ATCC 25923

            10-100

            ≥70%

            +++

            乳白色大菌落

            化膿性鏈球菌

            ATCC 19615

            10-100

            ≥70%

            +++

            白色小菌落




            圖1 Todd-Hewitt瓊脂培養基微生物質控結果




            注:本文屬海博生物原創,未經允許不得轉載。


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