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細胞培養皿實驗時“小黑點”現象的剖析
閱讀：2087 發布時間：2021-11-5
細胞培養皿適宜細胞和組織的中等規模培養，也可做稱量、分離和處理組織或細胞等多種實驗中的暫放和儲存容器使用。在使用前要經過清潔消毒，培養皿清潔與否對工作影響較大，可影響培養基的酸堿度，若有某些化學藥品的存在，會抑制細菌生長。
新購的細胞培養皿應先用熱水沖洗，再置于質量分數為1%或2%的鹽酸溶液中浸泡數小時，使游離堿性物質除去，再用蒸餾水沖洗2次。
細胞培養時常見到細胞及培養液中有一些大小不等、形態不同的未知“黑點”。細胞培養時由于細胞代謝、物質交換、周邊環境變化，尤其是在從37℃培養箱中拿出來觀察的過程中，由于液體培養基的比熱較大，液內溫度高于外界溫度，造成冷熱交換、小范圍內形成液體流動加劇，當然這些小碎末就會被攪動起來形成似乎“游動”的感覺；隨著細胞培養的繼續，部分細胞開始衰亡，細胞膜結構破裂，破裂后的細胞內容物泄露到培養液中。尤其是溶酶體的破壞，連續性地造成其他細胞和細胞器的損傷，如果換液不很勤，就會出現進一步破壞和殘渣的出現。“黑點”問題是很多細胞培養者已經發現的問題，但到目前為止尚未找到其監測和排除的試劑和手段，這首先是由于所謂“黑點”病原體根本難以收集和捕捉，這也從另一個側面證明了“黑點”問題的難以確定性；再說任何一種外來的微生物在培養基中都會有生命活動的反應和表現，而不是簡單地運動那樣的外觀性表現。
如果“黑點”的運動狀況已經到了用顯微鏡已經可以觀察出的程度，其營養代謝和能量需求也就可想而知。這樣，培養液中的影響消耗、酸堿含量程度等都要發生明顯變化。
比如迅速的、大含量的沉淀，pH值的迅速下降，細胞大量破碎死亡、引發其它類型微生物侵染等等。而這些狀況，在所謂的“黑點”感染中，是很難觀察到的。同時“黑點”的出現而影響細胞狀態似乎得不到有力的證據。倒是細胞狀態下降的時候，“黑點”明顯增多了。很有可能是細胞狀態下降時，細胞衰亡產生的細胞碎片。所以“黑點”屬于細胞碎片是比較可能和合理的。