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            武漢原生原代生物醫藥科技有限公司

            原代細胞培養實驗室組建的基本要求

            時間:2021-9-10 閱讀:702
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              一、實驗室設計
              1、細胞培養是一種無菌操作技術,要求工作環境和條件必須保證無微生物污染和不受其它有害因素的影響。
               
              2、細胞培養室和設計原則是防止微生物污染和有害因素影響,要求工作環境清潔、空氣清新,干燥和無煙塵。
               
              3、細胞培養室的設計原則一般是無菌操作區設在室內較少走動的內側,常規操作和封閉培養于一室,為10萬級潔凈環境的潔凈室。而洗刷消毒工作設在潔凈室外,避免物品污染潔凈室內環境。細胞潔凈室需要一個空調系統并對外界保持一定的正壓。
               
              4、解剖實驗室主要用于對器官組織的分離,需要有無菌操作臺、解剖顯微鏡、各種手術器材等。
               
              二、實驗室設備
              1、超凈工作臺/生物安全柜
              細胞培養需要無菌要求高的環境,在進行操作細胞的實驗時,需要在100級的空氣下進行,那我們就需要購買能提供百級潔凈度的超凈工作臺或生物安全柜了。
              對絕大多數實驗來說,超凈工作臺已經可以*實驗員的操作需要。至于超凈臺的尺寸,要看實驗室的大小以及人員的多少來確定,是買單人的還是雙人的,是買單面的還是雙面的,以及買幾臺等等。如果操作的實驗具有生物危險性,則應選擇較之超凈臺更加高級的生物安全柜。安全柜和超凈臺在使用上沒有多大區別,但是安全柜對人員具有保護,適用于那些對人體有害的病毒或細胞細菌等實驗。需要說明的是,超凈臺或安全柜的擺放應當避開房門,空調等擾動附近氣流的地方。
               
              2、二氧化碳培養箱
              細胞培養所用的緩沖體系是碳酸氫鈉+HEPES體系,所以需要二氧化碳提供緩沖能力維持pH。這時我們就需要一個二氧化碳培養箱來對細胞進行培養。并且由于二氧化碳培養箱通常不具有制冷壓縮機,所以需要用戶確定其細胞房內在夏天也有全天候的空調制冷,否則會造成箱內溫度超標。另外二氧化碳培養箱也分為氣套式和水套式,所謂的氣套式就是直接的電熱絲加熱,箱體升溫較快,但是溫度精度及保溫效果會稍差;而水套式則利用浸泡在水中的電熱絲加熱包裹在箱體內膽外的水套來達到控溫的效果,其升溫慢但是保溫的效果良好,即使短時間發生斷電也不怕影響箱體內的細胞生長。
               
              3、倒置顯微鏡
              需要倒置顯微鏡的幫助。對于一些熒光免疫細胞實驗(IF),則還需要購買倒置的熒光顯微鏡。
               
              4、純水機/超純水機
              細胞培養還需要超純水系統,普通的純水和蒸餾水是無法用于細胞培養的,而超純水主要用于配置一些培養基和試劑,超純水的進水可為自來水或二級純水(質量好些的去離子水,電阻10兆歐左右),細胞培養用水除了超純以外,最主要對內毒素有嚴格的要求,所以在挑選超純水機的時候就要挑選含超濾組件的機型。
               
              5、離心機
              細胞培養需要離心收集傳代細胞,一般轉速在1000轉到1500轉之間,所以需要購買低轉速的常溫離心機,而且要帶10ml,50ml及培養板的轉子。另外還需要一臺高速冷凍離心機用于收集細胞沉淀或細胞上清。
               
              6、液氮罐
              建立一個細胞庫,液氮罐就是必須的,放入液氮罐內的凍存細胞一般可以保證在近十年的時間內都具有生物活性,至于需要多大的液氮罐要根據細胞庫的大小而定。
               
              7、低溫冰箱
              細胞在凍存時需要存放-70到-80度過夜再放入液氮罐,這樣則需要一個低溫冰箱。
               
              8、傳遞窗
              細胞房在構建時要與外界隔絕,這樣就需要購買傳遞窗來傳遞物品,減少污染的幾率,并且將所有進入細胞室的物品都在傳遞窗內進行紫外殺菌,可以保證潔凈室的安全。
               
              9、高壓滅菌鍋
              各類細胞實驗室器皿在使用前后都需要做滅菌處理,滅菌條件一般為121℃,20~30分鐘,這樣就需要一臺放置在潔凈室外的高壓滅菌鍋來保障生物安全性。
               
              10、移液槍,電動移液槍
              細胞實驗操作時,需要使用各種吸頭及移液管,所以配置移液槍是必要的。
               
              11、細胞培養中需要的各種耗材
              各類細胞培養板,細胞培養瓶,平皿移液管等。
                
              12、其余儀器
              對于細胞實驗還可能需要振蕩器及磁力攪拌器用于混勻液體;還有一些沾滿細胞的難清洗的不銹鋼類或玻璃類器皿,則需要超聲波清洗機的幫助;如果涉及免疫實驗,肯定需要冰浴,碎冰的需求量大的話,則需要購買制冰機;另外破碎細胞可能會需要超聲波細胞破碎儀;最后需提及的是如果細胞房較大,則要配備手推車,實驗時搬動那些液體培養基總是件折磨人的事情。


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