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            武漢原生原代生物醫(yī)藥科技有限公司

            PriCells: 臺盼藍染色法

            時間:2021-10-15 閱讀:1852
            分享:
            PriCells: 臺盼藍染色法
            材料:
            1. 顯微鏡、玻片、蓋玻片、滴管;
            2. 試劑:0.4%臺盼藍染液;
            3. 臺盼藍(Trypan blue):0.4g;
            4. 生理鹽水:100ml;
            操作步驟:
            1. 用Hanks液配制0.1%臺盼藍溶液;
            2. 用0.5%胰蛋白酶:0.2%EDTA=1:1混合液來消化培養(yǎng)的貼壁細胞;
            3. 再加入適量Hanks液制成細胞懸液;
            4. 將待染色細胞稀釋至所需濃度(方法及濃度范圍與細胞計數(shù)相同);
            5. 每0.1ml細胞懸液約加新鮮配制的染液一小滴,室溫下染3—5min;
            6. 染色過的細胞材料,取一滴細胞懸液置玻片上,加蓋玻片后放高倍鏡下觀察;
            7. 死亡的細胞著淺藍色并膨大,無光澤?;罴毎恢⒈3终P螒B(tài),有光澤;
            8. 計數(shù)1000個細胞中的活細胞和死細胞數(shù)目;
            9. 統(tǒng)計未染色細胞。可按公式計算出細胞活率。
            細胞活率(%)=未染色的細胞數(shù)/觀察的細胞總數(shù)×100
            注意事項:
            1. 染色時間不能太長,否則活細胞也會逐漸積累染料而染成顏色,使監(jiān)測結(jié)
            果偏低;
            2. 另可結(jié)合細胞計數(shù)方法,同時進行細胞計數(shù)和活力檢測;



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