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            武漢原生原代生物醫藥科技有限公司

            PriCells: 蘇木精-伊紅(HE)染色

            時間:2021-10-15 閱讀:461
            分享:
            PriCells: 蘇木精-伊紅(HE)染色
            染液制備:
            1.      蘇木精染液
            (1)    稱取0.5g蘇木精、5.0g銨礬或鉀礬和0.1g碘酸鈉加溫溶于70ml蒸餾水中;
            (2)    加入30ml甘油和2ml冰乙酸充分混勻后過濾即成母液;
            (3)    母液可長期保存。用蒸餾水以1:20稀釋母液即成工作液。工作液也較長時間儲存,但每次染色前宜過濾,去除氧化膜;
            2.      伊紅染液
            伊紅有醇溶性與水溶性之分。將0.5g伊紅溶于100ml 70%乙醇或蒸餾水即成工作液;
            染色步驟:
            1.      用37℃的溫BSS漂洗3次,每次20s—1min;
            2.      用中性福爾馬林固定30min;
            3.      用蒸餾水漂洗1次,再用蒸餾水稀釋的蘇木jing液(1/20)染10min;
            4.      先用自來水沖洗幾次,而后置入1% NaHCO3液中漂洗至藍紫色;
            5.      在放入伊紅水溶液中染30s—1min;
            6.      用蒸餾水沖洗,迅速通過丙酮2次,每次3—5min;
            7.      通過2:1丙酮/二甲苯3次,每次1—2min;
            8.      通過1:2丙酮/二甲苯3次,每次1—2min;
            9.      放入純二甲苯5—10min,用光學樹脂封片后觀察;
            10.    把蓋片置載物玻片上,令小蓋片細胞面向上,用樹膠封存,再覆以較大蓋片;
            結果:
            原代細胞核染成紅色,胞質染成藍紫色;



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