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            武漢原生原代生物醫藥科技有限公司

            PriCells: 密度梯度分離法分離單個核細胞(MNCs)

            時間:2021-10-29 閱讀:302
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            PriCells: 密度梯度分離法分離單個核細胞(MNCs)                            


            試劑和材料:
            1. 合適的培養基或冷凍液;
            2. PBSA;
            3. Ficoll-Hypague;
            4. 巴氏吸管;
            5. 50ml離心管;

            實驗方法:
            1. 將臍血樣品用PBSA按1:1比例稀釋;
            2. 將15ml Ficoll-Hypague吸入50ml離心管;
            3. 將30mlPBSA稀釋的臍血樣品緩慢地加到Ficoll-Hypague上;
            4. 室溫450g離心20-30min;
            5. 離心后,在Ficoll-Hypague液面上明細可見一層細胞,是密度低于Ficoll-Hypague液的單個核細胞層;
            6. 用巴氏吸管,將單個核細胞層吸出,轉移到另一離心管中;
            7. 用PBSA洗細胞,室溫200g離心10min;
            8. 倒掉上清,用PBSA重懸細胞,洗細胞,重復上述步驟7;
            9. 最后,用合適的培養基重懸細胞(冰凍液或培養基);

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