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            武漢原生原代生物醫藥科技有限公司

            PriCells: 臍血MSCs的分離

            時間:2021-11-1 閱讀:241
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            PriCells: 臍血MSCs的分離                                                                                          


            試劑和材料: 
            1. 培養基;
            2. 0.05%胰蛋白酶,含EDTA;
            3. PBSA;
            4. T25;


            實驗方法:
            1. 為了獲得新鮮制備的CB-MNCs,按密度梯度分離法分離單個核細胞(MNCs);
            2. 用培養基重懸新鮮分離或凍存的MNCs。凍存的MNCs在鋪板前要37℃迅速復蘇并用培養基洗一遍;
            3. 將重懸在培養基的CB-MNCs接種到T25的培養瓶,接種密度為3×105 個細胞/cm2
            4. 將細胞放入37℃ 5%CO2的培養箱中;
            5. 每7天更換一次培養基,直到貼壁生長的成纖維細胞樣的細胞達到匯合;
            6. 一旦達到匯合,用0.05%胰蛋白酶/EDTA處理5min,重懸細胞,然后將細胞按1×105 個/瓶重新接種;
            7. 達到細胞匯合后,用培養基按1:5稀釋后再接種培養;

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