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            武漢原生原代生物醫(yī)藥科技有限公司

            小鼠神經(jīng)小膠質(zhì)細胞概述和運輸保存說明

            時間:2022-1-25 閱讀:562
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              小鼠神經(jīng)小膠質(zhì)細胞是神經(jīng)膠質(zhì)形成的主要功能細胞。神經(jīng)膠質(zhì)出現(xiàn)在大腦發(fā)育早期向成熟階段轉(zhuǎn)化的過程中,當程序性細胞死亡時,或在大腦發(fā)育的過程中,中樞神經(jīng)系統(tǒng)受損或受到病理損壞時,神經(jīng)膠質(zhì)可做為大腦的巨噬細胞。膠質(zhì)細胞能在II類組織相容性復合體表達CD-4陽性T細胞時表達抗原,能進行Fc介導的巨噬作用,并且與造血細胞和巨噬細胞組織共享抗原。
              小鼠神經(jīng)小膠質(zhì)細胞采用胰酶消化制備而來。細胞的培養(yǎng)采用公司產(chǎn)品小鼠神經(jīng)小膠質(zhì)細胞培養(yǎng)試劑盒(MouseBrainPrimaCell?:NormalNerveMicrogliaCatNo.3-4428)來優(yōu)化目的細胞生長條件,以降低雜細胞(如脂肪細胞、纖維細胞等)的污染,同時保證質(zhì)量的穩(wěn)定。在技術部標準的操作流程下,小鼠神經(jīng)小膠質(zhì)細胞傳5代仍可以保持原代細胞的分化狀態(tài),進而可以用于評估體外藥物模型系統(tǒng)和調(diào)節(jié)特定基因的遺傳功能。
              小鼠神經(jīng)小膠質(zhì)細胞運輸和保存:
              1)1mL凍存細胞懸液裝于1.8ml的凍存管中,置于裝滿干冰的泡沫保溫盒中進行運輸;收到細胞后請盡快解凍復蘇細胞進行培養(yǎng),如無法立刻進行復蘇操作,凍存細胞可在-80℃的條件下保存1個月。
              2)T-25培養(yǎng)瓶充滿*培養(yǎng)基后進行常溫運輸;收到細胞后請鏡下觀察細胞生長狀態(tài),如鋪瓶率超過85%請立即進行傳代操作,如懸浮的細胞較多,請將培養(yǎng)瓶至于培養(yǎng)箱中靜置過夜以幫助未死亡的懸浮細胞能夠再次貼壁。
              培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準備:
              1)準備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640:GIBCO,貨號21875-091),90%;優(yōu)質(zhì)胎牛血清,10%。
              2)培養(yǎng)條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。 溫度:37℃,培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
              3)凍存液:90%血清,10%DMSO,現(xiàn)用現(xiàn)配,液氮儲存。

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