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            武漢原生原代生物醫藥科技有限公司

            小鼠肝竇內皮細胞傳代方法供參考

            時間:2022-9-8 閱讀:166
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              小鼠肝竇內皮細胞分離自肝臟組織,是用混合酶灌流消化、反復低速離心、密度梯度離心法,并通過內皮細胞專用培養基培養篩選制備而來。
              小鼠肝竇內皮細胞對于貼壁細胞,傳代可參考以下方法:
              1. 棄去培養上清,用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細胞1-2次。
              2. 加2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培養瓶中,置于37℃培養箱中消化1-2分鐘,然后在顯微鏡下觀察Ⅱ型肺泡上皮細胞|細胞消化情況,若細胞大部分變圓并脫落,迅速拿回操作臺,輕敲幾下培養瓶后加少量培養基終止消化。
              3. 按6-8ml/瓶補加培養基,輕輕打勻后吸出,在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養液后吹勻。
              4. 將細胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養基的新皿中或者瓶中。
              對于懸浮細胞,傳代可參考以下方法:
              方法一:收集細胞,1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養液后吹勻,將細胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養基的新皿中或者瓶中。
              方法二:可選擇半數換液方式,棄去半數培養基后,將剩余細胞懸起,將細胞懸液按1:2到1:3的比例分到新的含8ml培養基的新皿中或者瓶中。

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