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            武漢原生原代生物醫藥科技有限公司

            小鼠雪旺氏細胞傳代可參考以下方法

            時間:2022-9-23 閱讀:240
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              小鼠雪旺氏細胞分離神經組織;周圍神經系統中的神經膠質細胞稱施萬(schwann,又名雪旺細胞)細胞,它沿神經元的突起分布。施萬細胞包裹在神經纖維上,這種神經纖維叫有髓神經纖維。有髓神經纖維和無髓神經纖維的施萬細胞的形態和功能有所差異,施萬細胞的外表面有基膜,能分泌神經營養因子,促進受損的神經元的存活及其軸突的再生,參與周圍神經系統中神經纖維的構成。施萬細胞的胞核呈長卵圓形,其長軸與軸突平行,核周有少量胞質。
              由于施萬細胞包在軸突的外面,故又稱神經膜細胞(neurilemmalcell),它的外面包有一層基膜。施萬細胞最外面的一層胞膜與基膜一起往往又稱神經膜(neurilemma),光鏡下可見此膜。在有髓神經纖維發生中,伴隨軸突一起生長的施萬細胞表面凹陷成一縱溝,軸突位于縱溝內,溝緣的胞膜相貼形成軸突系膜(mesaxon)。軸突系膜不斷伸長并反復包卷軸突,把胞質擠至細胞的內、外邊緣及兩端(即靠近郎氏結處),從而形成許多同心圓的螺旋膜板層,即為髓鞘。故髓鞘乃成自施萬細胞的胞膜,屬施萬細胞的一部分。施萬細胞的胞質除見于細胞的外、內邊緣和兩端外,還見于髓鞘板層內的施-蘭切跡。該切跡構成螺旋形的胞質通道,并與細胞外、內邊緣的胞質相通。
              對于小鼠雪旺氏細胞,傳代可參考以下方法:
              1. 棄去培養上清,用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細胞1-2次。
              2. 加2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培養瓶中,置于37℃培養箱中消化1-2分鐘,然后在顯微鏡下觀察Ⅱ型肺泡上皮細胞|細胞消化情況,若細胞大部分變圓并脫落,迅速拿回操作臺,輕敲幾下培養瓶后加少量培養基終止消化。
              3. 按6-8ml/瓶補加培養基,輕輕打勻后吸出,在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養液后吹勻。
              4. 將細胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養基的新皿中或者瓶中。
              對于懸浮細胞,傳代可參考以下方法:
              方法一:收集細胞,1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養液后吹勻,將細胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養基的新皿中或者瓶中。
              方法二:可選擇半數換液方式,棄去半數培養基后,將剩余細胞懸起,將細胞懸液按1:2到1:3的比例分到新的含8ml培養基的新皿中或者瓶中。

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