病理 | 組織包埋技術（下）

在上篇文章中介紹了什么是組織包埋以及各種包埋劑的挑選和使用，接下來帶領大家了解特殊包埋方法以及如何使石蠟包埋取得最佳效果。

我們正常的病理標本采用石蠟包埋都可以獲得較為滿意的切片，但有些標本需要特殊方法才能制作，用普通的包埋方法達不到要求，比如需要加急的標本、又比如體液標本，這樣的標本就需要有特殊的包埋方法。

01  快速石蠟包埋法

主要應用于加急標本的快速診斷，且組織塊太小或太碎，無法采用冰凍切片方法制片時，取材要薄。將薄小的組織塊投入40%甲醛10ml、95%乙醇85ml、冰cu酸5ml的混合固定兼脫水液中2分鐘，入純丙酮Ⅰ3分鐘，入純丙酮Ⅱ3分鐘，入苯2分鐘，浸蠟5分鐘，快速包埋組織后進行冷卻切片、烤片、脫蠟至水、染色及封固。

02  體液石蠟包埋法

對于體液標本，如痰液、胃液、尿液、腹水和胸水等，作病理切片檢查時，也可用石蠟進行包埋。

如果是痰液，應選取痰中含有血液的部分或可疑的實體部分，包在雙層紗布內(nèi)，先以10%中性甲醛固定，再經(jīng)脫水、透明和浸蠟，最后包埋。濁的液體放入離心管中，以2000～3000次/分鐘轉速進行離心沉淀15秒。

凡是新鮮胃液、尿液、腹水和胸水等液體標本，應先倒去上面的澄清液體，將下面較為混濁的液體放入離心管中，以2000～3000次/分鐘轉速進行離心沉淀5～10分鐘。再倒去上清液，并以10%甲醛固定下面的沉淀物，然后進行脫水、透明、浸蠟和包埋。

如何使石蠟包埋取得最佳效果

我們可以做一些提高石蠟包埋效果的工作，以人為的力量改善石蠟的韌性和黏度：這種方法是在石蠟中加入一些其他物質(zhì)。

01   蜂蠟

蜂蠟，又叫黃蠟，是蜜蜂用來造巢的淡黃色蠟，蜂蠟的熔點在54℃左右，質(zhì)地柔軟，滑潤有韌性。為了使低熔點的石蠟硬一些，可加入10%～20%的蜂蠟。它能增加蠟的熔點而不必使組織浸在高溫內(nèi)，便于切片。同時也要根據(jù)組織的種類而異，一般常規(guī)用量不超過5%為度。

一般我們?nèi)缜兄?～5μm的切片，56～58℃的石蠟基本達標，但如果要切制1～3μm的切片，其韌性和黏度就顯不夠，就會出現(xiàn)石蠟無法支撐的現(xiàn)象，因為光有硬度的石蠟會很脆，容易斷裂，如果加入蜂蠟，使其韌性和黏度加強，就可以制出更好的切片。

02   硬脂酸

如果想加強石蠟的硬度，可以加入硬脂酸、松香等。硬脂酸為有光澤的白色片狀結晶體，不溶于水，而溶于乙醇，醚和氯fang。熔點64～71℃，在蠟中加入少量的硬脂酸可增加石蠟的滲透性。

03   松香

為棕黃色半透明的固體，質(zhì)硬而脆，遇熱熔解，呈膠體狀，同石蠟混合時，可增加石蠟的硬度，由于松香質(zhì)脆，混合后可增加硬度但韌性不足。

當然使用質(zhì)量好的石蠟，也是重要的，不能為了省錢，而購置雜質(zhì)很多的石蠟，切出的片子也好不到哪去。因含雜質(zhì)太多不光影響石蠟對組織的浸透，而且在切片時，還可因石蠟的雜質(zhì)過多，含有大的顆粒，而使片子出現(xiàn)劃痕。

Leica提供多種石蠟供選擇，其中39601006（Paraplast  Regular石蠟，常用型，顆粒裝，8*1公斤/箱，56℃，脫水/包埋通用）和39601095（Paraplast High Melt石蠟，高熔點型，顆粒裝，8公斤裝，56-58℃，脫水/包埋通用）廣州東銳常備庫存。

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