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細(xì)胞學(xué)堂 | 如何判斷細(xì)胞狀態(tài)

時(shí)間：2023-9-28 閱讀：1624

培養(yǎng)細(xì)胞時(shí)，由于培養(yǎng)的環(huán)境各不相同，同時(shí)細(xì)胞各階段的形態(tài)也存在一定差異，沒有一個(gè)確定的參照物去比對(duì)，很多老師同學(xué)也無法確定自己所養(yǎng)細(xì)胞的狀態(tài)是否正常。

那么如何判斷細(xì)胞狀態(tài)是正常還是異常呢？本期細(xì)胞學(xué)堂將詳介紹幾種常用的判斷方法，學(xué)會(huì)這幾招，輕松辨別細(xì)胞狀態(tài)！

01 如何判斷細(xì)胞活率

臺(tái)盼藍(lán)染色法

臺(tái)盼藍(lán)是細(xì)胞活性染料，常用于檢測(cè)細(xì)胞膜的完整性，可以檢測(cè)出細(xì)胞是否存活。正常的活細(xì)胞，胞膜結(jié)構(gòu)完整，能夠排斥臺(tái)盼藍(lán)，使之不能夠進(jìn)入胞內(nèi)；而喪失活性或細(xì)胞膜不完整的細(xì)胞，胞膜的通透性增加，可被臺(tái)盼藍(lán)染成藍(lán)色。

通常認(rèn)為細(xì)胞膜完整性喪失，即可認(rèn)為細(xì)胞已經(jīng)死亡。活細(xì)胞不著色，而死細(xì)胞會(huì)被染成藍(lán)色。

(無色為活細(xì)胞，藍(lán)色為死細(xì)胞)

染色時(shí)間不能太長(zhǎng)，3分鐘內(nèi)觀察，超時(shí)后活細(xì)胞也會(huì)逐漸積累染料而染成顏色，使檢測(cè)結(jié)果出現(xiàn)偏差。

顯微鏡觀察法

在顯微鏡下觀察細(xì)胞形態(tài)：

懸浮細(xì)胞

活細(xì)胞透亮有光澤，死細(xì)胞暗淡無光且膜碎裂；

貼壁細(xì)胞

活細(xì)胞可貼壁且膜完整，死細(xì)胞不能貼壁。

（紅色圈為死細(xì)胞；綠色圈為活細(xì)胞；箭頭為血清雜質(zhì)）

細(xì)胞膜作為判斷細(xì)胞活性的標(biāo)準(zhǔn)之一，有的老師用“邊界清晰"來界定，認(rèn)為邊界不清晰則是細(xì)胞狀態(tài)變差，實(shí)際情況我們也有發(fā)現(xiàn)部分細(xì)胞膜邊緣很薄再加上顯微鏡不清晰導(dǎo)致誤判，所以小普認(rèn)為膜邊界是否清晰并不是金標(biāo)準(zhǔn)，我們更傾向于以細(xì)胞膜完整性作為判斷標(biāo)準(zhǔn)，“膜完整"則為活細(xì)胞。

（該細(xì)胞膜邊緣薄透，若為黃光顯微鏡可能看不清）

02 如何判斷細(xì)胞形態(tài)異常

你的細(xì)胞應(yīng)該長(zhǎng)成什么樣?

在懷疑細(xì)胞形態(tài)改變之前，我們首先得知道一個(gè)正常的細(xì)胞應(yīng)該是什么樣的，誠如每顆多肉都會(huì)有其獨(dú)-特的色彩和習(xí)性，細(xì)胞也有其獨(dú)-特的習(xí)性，包括生長(zhǎng)速度、形態(tài)、培養(yǎng)環(huán)境等；

從哪幾個(gè)方面判定細(xì)胞形態(tài)異常？

細(xì)胞的微環(huán)境會(huì)導(dǎo)致細(xì)胞形態(tài)改變，例如血清直接影響細(xì)胞的形態(tài)：