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細胞學(xué)堂 | 細胞拉絲的五大常見原因及解決方法
通常情況下，細胞在體外培養(yǎng)環(huán)境中大多呈現(xiàn)扁平、多角形或圓形等形態(tài)，這些細胞形態(tài)對于細胞的營養(yǎng)吸收、分裂增殖及物質(zhì)轉(zhuǎn)運等生理活動至關(guān)重要。然而，不少研究者在實際培養(yǎng)過程中會遇到細胞形態(tài)異常的問題，尤其是細胞出現(xiàn)“拉絲"現(xiàn)象。這一現(xiàn)象，往往伴隨細胞狀態(tài)變差，對實驗結(jié)果的準確性及實驗進展構(gòu)成了不容忽視的影響。
本期細胞學(xué)堂，我們將為您詳細介紹細胞培養(yǎng)過程中出現(xiàn)拉絲現(xiàn)象可能的原因，并針對性提供解決方法，助您細胞培養(yǎng)無憂！
某些細胞株在正常培養(yǎng)過程中，如SH-SY5Y（人神經(jīng)母細胞瘤細胞）和K7M2 wt（小鼠骨肉瘤成骨細胞），通過光學(xué)顯微鏡觀察（如圖1和2所示），細胞本身形態(tài)就有拉絲和觸角狀形態(tài)，是其正常形態(tài)。
圖1. SH-SY5Y細胞形態(tài)
圖2. K7M2 wt細胞形態(tài)
解決方法：
在初次培養(yǎng)不熟悉的細胞過程中，若觀察到拉絲現(xiàn)象，首先建議參考權(quán)-威細胞庫提供的細胞圖片，以鑒別該細胞本身是否具有拉絲的形態(tài)特征。對于本身形態(tài)就存在拉絲特征的這類細胞，無需針對拉絲現(xiàn)象進行特殊處理。然而，如果經(jīng)過對比明確細胞本身不具有拉絲的形態(tài)特征，且伴隨有細胞增殖變慢或其他改變時，那么就需要進一步排查可能的原因。
細胞接種密度過高時，細胞之間的營養(yǎng)和空間競爭會加劇，這種競爭壓力可能導(dǎo)致細胞形態(tài)拉絲。若使用無血清培養(yǎng)基培養(yǎng)間充質(zhì)干細胞，接種密度過低，也可能導(dǎo)致細胞長不起來，細胞形態(tài)會逐漸伸長拉絲。
解決方法：
根據(jù)細胞的特性，選擇合適的接種密度，并定期進行細胞傳代，將細胞密度維持在合適范圍內(nèi)。
如培養(yǎng)基配方錯誤、培養(yǎng)基中關(guān)鍵營養(yǎng)物質(zhì)（如氨基酸、維生素、生長因子等）不足、pH值變化、溫度波動或氣體環(huán)境（如CO?濃度）不適宜，均可能影響細胞正常形態(tài)與功能，導(dǎo)致細胞拉絲。
解決方法：
使用新鮮配制的培養(yǎng)基培養(yǎng)細胞；根據(jù)細胞的生長情況，及時換液，確保培養(yǎng)過程中營養(yǎng)充足；必要時可嘗試提高血清使用濃度（終濃度不超過20%）或更換高品質(zhì)胎牛血清（如圖3所示）。
圖3. Renca（小鼠腎癌細胞）細胞形態(tài)
在處理如貼壁細胞等需要消化的細胞時，解離試劑的選擇、消化時間的控制、操作力度的把握等都至關(guān)重要。解離試劑選擇不當(dāng)、消化時間過長或操作力度過大等均可能導(dǎo)致細胞受損，進而引發(fā)細胞形態(tài)改變，出現(xiàn)拉絲現(xiàn)象。
解決方法：
針對不同細胞選擇合適的解離試劑，控制消化時間，在消化過程中操作輕柔，最-大程度降低消化過程對細胞的損傷。
在細胞培養(yǎng)的過程中，若出現(xiàn)細菌、真菌、支原體、黑膠蟲等污染，其與細胞爭奪營養(yǎng)，同時產(chǎn)生有細胞毒性的代謝產(chǎn)物，將會導(dǎo)致細胞狀態(tài)明顯變差，細胞可能出現(xiàn)拉絲現(xiàn)象。
解決方法：
提高細胞培養(yǎng)過程中的無菌操作意識，使用無菌試劑、耗材。對于支原體、黑膠蟲等不易察覺的污染，可以定期檢測或空培確定是否發(fā)生污染。及時發(fā)現(xiàn)，及時處理，有效防止污染范圍的擴大。
以上就是關(guān)于細胞拉絲原因及解決方法的詳細解讀，更多細胞培養(yǎng)干貨，請持續(xù)關(guān)注細胞學(xué)堂專欄~