一句話知曉實(shí)驗(yàn)方法怎么選？

在分子生物學(xué)實(shí)驗(yàn)室里的玩法，無非就是用某種特定的刺激物（如細(xì)胞活素）去刺激一些細(xì)胞或組織，讓它們 high 起來，然后分析細(xì)胞對這些外源刺激物的反應(yīng)，檢測細(xì)胞內(nèi)哪條信號(hào)通路被激活或失活，或者什么蛋白被分泌出來。這里面就有很多種方法，哪種最合適，關(guān)鍵看你要檢測這個(gè)反應(yīng)的哪個(gè)方面的特性。

WB 

建立蛋白質(zhì)的個(gè)人檔案 

一個(gè)典型的免疫印跡實(shí)驗(yàn)（Western Blot，WB）可檢測信號(hào)通路中某種蛋白質(zhì)的特性、表達(dá)和分布，分析容量大、敏感度高、特異性強(qiáng)。但至于蛋白-蛋白相互作用則要用另一種更復(fù)雜的方法，即免疫共沉淀法（ Coimmunoprecipitation，Co-IP），它接近細(xì)胞內(nèi)的生理情況，是以成為經(jīng)典方法。

SPR 

想知道 Ta 和 Ta 能有多親密？ 

表面等離子共振（Surface Plasmon Resonance，SPR）除了研究蛋白-蛋白相互作用（例如受體-配體相互作用），還有可研究小分子-蛋白或細(xì)胞-蛋白的相互作用。這種方法不需要標(biāo)記蛋白（熒光標(biāo)記或同位素標(biāo)記），還可以實(shí)時(shí)定量分析這些相互作用的親和力、熱力學(xué)、動(dòng)力 學(xué)特性。SPR 是分析動(dòng)力學(xué)和親和力的金標(biāo)準(zhǔn)。

這些分析用酶聯(lián)免疫吸附實(shí)驗(yàn)（EenzymeLinked ImmunosorbentAssay，ELISA）也可以做，原理差不多。

PCR 

把小樹養(yǎng)大才能更好地招風(fēng) 

轉(zhuǎn)錄因子激活并和靶基因結(jié)合之后，該基因就被激活。PCR（Polymerase Chain Reaction）或Real Time PCR 可以把特定的 DNA 序列大幅擴(kuò)增，便于檢測活性基因的表達(dá)情況。

ELISA 

追蹤到天涯海角！ 

如果要看看細(xì)胞外如何，比如細(xì)胞培養(yǎng)上清液或體液中的某種蛋白質(zhì)分泌情況，則通常選用 ELISA，從而獲知相應(yīng)基因的活性。