實(shí)時(shí)熒光定量PCR總述

第一章：實(shí)時(shí)熒光定量 PCR 總述

一、實(shí)時(shí)熒光定量 PCR 的概念

實(shí)時(shí)熒光定量 PCR 即 Real-time PCR，利用熒光信號積累實(shí)時(shí)監(jiān)測整個 PCR 進(jìn)程，最后通過C_T 值和標(biāo)準(zhǔn)曲線對未知模板進(jìn)行定量分析的方法。

二、實(shí)時(shí)熒光定量 PCR 的原理

A 化學(xué)原理

變產(chǎn)物DNA分子為熒光信號，通過測定熒光值即可反映產(chǎn)物 DNA分子量。

B 數(shù)學(xué)原理

通過循環(huán)數(shù)“n"(C_T 值 ) 來計(jì)算起始 DNA 量。

三、實(shí)時(shí)熒光定量 PCR 方法的選擇

四、實(shí)時(shí)熒光定量 PCR 的優(yōu)勢

比較不同樣品間某基因的“量"的方法：

實(shí)時(shí)熒光定量PCR的優(yōu)點(diǎn)：

(1)能夠?qū)崟r(shí)監(jiān)測PCR反應(yīng)的進(jìn)程；

(2)具有更大的檢測范圍，能夠?qū)颖局械钠鹗剂窟M(jìn)行準(zhǔn)確定量；

(3)在單管中同時(shí)實(shí)現(xiàn)擴(kuò)增和檢測，無需PCR后處理。

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