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安捷倫2D-LC液相色譜中藥/天然產物應用快報（下篇）
安捷倫始終致力于 2D-LC 等新技術的投入和研發，創造出更為先進的色譜分離技術并不斷改寫歷史。選擇安捷倫 2D-LC，讓您的實驗室獲得分離能力更強、更靈活、更易用的二維液相色譜分離方案。
安捷倫 2D-LC 主要提供兩種不同的分離模式：中心切割 2D-LC 和全二維液相（LCxLC）。其中，中心切割 2D-LC 又包含（多）中心切割（MHC）和高分辨率采樣（HiRes）模式：
（多）中心切割（MHC）
將一個或多個感興趣的峰貯存，隨后在第二維中進一步分析。
高分辨率采樣（HiRes）
將某個感興趣的峰進行多次切割并比較不同位置的結果，例如用于獲得可靠的定量結果。
全二維液相（LCxLC）
將全部一維分離的流出物以等量的方式切割并全部進入第二維分析，從而獲得更全面的結果。
安捷倫 2D-LC 解決方案可幫助您分離共洗脫化合物并實現最高的峰容量。在需要提高分離度時，可以利用中心切割和高分辨率采樣，或利用全二維液相色譜分離復雜混合物。使用二維液相色譜使待測物與不揮發的緩沖鹽分離且與 MS 檢測兼容：
2D-LC 的主要應用優勢
中藥/天然產物因其自身的復雜特性，在分離測定時，要求儀器不僅要能實現對中藥及天然產物的簡單化學成分及組成分析，還要實現對同品種中藥的化學聚類及溯源分析、正品與混淆品的特征差異性分析以及復方組成及代謝分析。而二維液相色譜技術在中藥質量研究中的應用，實現了新型液相色譜技術在中藥分析中的突破性應用，全面且有效地提升了上述中藥/天然產物分析的水平。
安捷倫二維液相色譜解決方案，以性能優異的液相色譜硬件、二維控制/采集軟件為基礎，全面實現全二維液相色譜（2D-LC）、（多）中心切割二維液相色譜分析和高分辨率采樣分析；同時，安捷倫二維液相色譜系統也全面兼容安捷倫質譜系統，質譜系統軟件可完全控制二維系統以實現全部二維功能。這使二維系統不僅可在需要時提高分離度解決復雜的分離問題，也可以同時獲得質譜相關定性定量結果，實現分離和定性一次完成，符合中藥/天然產物快速、準確分析的要求。
ZhangPeng Shang, Lulu Xu, Yao Xiao 等在 2021 年發表于《Journal of Chromatography A》的文章《A global profiling strategy using comprehensive two-dimensional liquid chromatography coupled with dual-mass spectrometry platforms: Chemical analysis of a multi-herb Chinese medicine formula as a case study》中，通過使用安捷倫 1290/1290 2D-LC 對含有 11 味中藥的小兒肺熱咳喘顆粒中的成分進行分離，對比 UV 和雙質譜檢測器平臺的檢測數據，最終在 46 分鐘內鑒定了 108 種化合物及額外的 151 種化合物。2D-LC 和雙質譜檢測器相結合，構建了一種用于多組分全局分析的普適性強大分析平臺。
2D-LC 和雙質譜系統的工作流程策略
A. Acquaviva, G. Siano等在 2020 年發表于《Journal of Chromatography A》的文章《Chiral × achiral multidimensional liquid chromatography. Application to the enantioseparation of dintitrophenyl amino acids in honey samples and their fingerprint classification》，使用了配有 2 位 /8 通閥的安捷倫 1290 Infinity II 2D-LC 系統的全二維（LC×LC）分離模式，構建了基于手性分離×反相的分離系統，對蜂蜜樣品中氨基酸的分離進行了優化（包括影響峰容量的關鍵參數如正交性、采樣頻率等），最終鑒定出不同蜂蜜樣品中存在的不同氨基酸種類。僅需通過簡單的構建，即可實現多維液相色譜在分離復雜樣品時，提高峰容量的目標。這是首次將全二維 2D-LC（LC×LC）應用于復雜天然樣品中氨基酸的對映體分離。
全二維 2D-LC（LC×LC）系統的模塊配置和流路圖
綠色框代表第一維，橙色框代表第二維
優化 12 個化合物在最佳色譜條件下，苯基 (A)和 C18(B) 色譜柱中 DNP- 氨基酸的手性×非手性分離等線圖
沈燦杰、馬陽等在 2022 年發表于《中草藥》的文章《多中心切割二維液相色譜法同時測定九味熄風顆粒中 10 種成分》中，使用了配以雙 2 位 /4 通閥的安捷倫 Infinity 1290II 2D-LC 系統的多中心切割模式（MHC），對由天麻、熟地黃、鉤藤等 9 味藥材組成的九味熄風顆粒中次黃嘌呤、天麻素等 10 種成分進行了測定，建立了含量測定方法。由于九味熄風顆粒中 10 種成分極性與含量差異大，使用傳統一維色譜時，不同類型的色譜柱均難以達到目標物的全部分離。而使用 2D-LC 系統多中心切割模式（MHC），選擇性的將第一維中難以分離的目標組分切割至第二維色譜中，從而實現 10 種組分的全部定量分析，系統方法學驗證結果表明本法的專屬性、穩定性、重復性、準確度均較好，2D-LC 的分離能力明顯優于一維液相。
多中心切割（MHC）二維液相系統連接示意圖
1-次黃嘌呤 2-天麻素 3-原兒茶酸 4-新綠原酸 5-綠原酸 6-馬錢苷酸 7-隱綠原酸 8-獐芽菜苦苷 9-龍膽苦苷 10-當藥苷
混合對照品 (A) 和 JXG 樣品 (B) 的一維 (1D) 和二維 (2D) 分離色譜圖