土壤全鈦試劑盒說(shuō)明書
微量法100T/96S
注 意：正式測(cè)定之前選擇2-3個(gè)預(yù)期差異大的樣本做預(yù)測(cè)定。
測(cè)定意義：
鈦是自然界廣泛存在的過渡金屬元素，與鐵元素緊密共生，二者存在一定的相關(guān)性，土壤中鈦對(duì)植物有及其重要的生理作用，充足的鈦可保證植物結(jié)實(shí)率提高，空癟率減少，并增強(qiáng)植物的抗害效果。
測(cè)定原理：
在酸性條件下，二安替比林甲烷與鈦離子生成黃色絡(luò)合物，在390nm處有特征吸收峰，顏色深淺在一定范圍內(nèi)與鈦離子濃度成正比。
自備實(shí)驗(yàn)用品及儀器：
天平、常溫離心機(jī)、可見分光光度計(jì)/酶標(biāo)儀、微量石英比色皿/96孔板，HCl。
試劑組成和配制：
提取液：自備。HCl：H2O =1:1。
試劑一：粉劑×1瓶，4℃保存。
試劑二：粉劑×1瓶，4℃避光保存。臨用前加4mL水充分溶解。
試劑三：液體8mL×1瓶，4℃保存。
樣本處理：
按照土壤質(zhì)量（g）：試劑一質(zhì)量(g)為1：5的比例（建議稱取約0.1g土樣，加入0.5g試劑一）稱取土樣于坩堝中，在900℃熔融20min，趁熱加10mL提取液溶解熔塊，待wan全溶解后于10000g ，25℃離心10min，取上清液待測(cè)。
測(cè)定操作表：
空白管 | 測(cè)定管 | |
樣本（μL） | 40 | |
試劑二（μL） | 40 | 40 |
提取液（μL） | 80 | 40 |
試劑三（μL） | 80 | 80 |
充分混勻，25℃靜置30min，于微量石英比色皿/96孔板，測(cè)定390nm處吸光值A，分別記為A空白管和A測(cè)定管，△A=A測(cè)定管-A空白管 | ||
計(jì)算公式：
a. 用微量石英比色皿測(cè)定的計(jì)算公式如下
標(biāo)準(zhǔn)曲線：y = 0.1064x +0.0078，R2 = 0.9971
全鈦含量（mg/kg）=（△A-0.0078）÷ 0.1064×V反總÷（W×V樣÷V樣總）
= 469.92×（△A-0.0078）÷W
V反總：反應(yīng)總體積，0.2mL；V樣：反應(yīng)體系中加入樣本體積，0.04mL；V樣總：加入提取液體積，10mL，W：樣本質(zhì)量，g
b. 用96孔板測(cè)定的計(jì)算公式如下
標(biāo)準(zhǔn)曲線：y = 0.0532x +0.0078，R2 = 0.9971
全鈦含量（mg/kg）=（△A-0.0078）÷ 0.0532×V反總÷（W×V樣÷V樣總）
= 939.84×（△A-0.0078）÷W
V反總：反應(yīng)總體積，0.2mL；V樣：反應(yīng)體系中加入樣本體積，0.04mL；V樣總：加入提取液體積，10mL，W：樣本質(zhì)量，g
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