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            蔗糖磷酸化酶(SP)測(cè)試盒的試劑組成和配制

            閱讀:1223      發(fā)布時(shí)間:2023-6-30
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            SP(EC2.4.1.7) 要存在于微生物和植物中,裂解葡萄糖苷鍵,催化葡萄糖基轉(zhuǎn)移到果糖 木糖半乳糖和鼠李糖等,合成相應(yīng)的葡萄糖基聚糖外,SP還能催化氫/醌合成熊果苷,具有美白效果,在化妝品工業(yè)中具有重要應(yīng)用。
            SP能夠以磷酸體,催化蔗糖產(chǎn)生1-磷酸葡萄糖,在葡萄糖磷酸酶催化6-磷酸葡萄糖,在 6-磷酸葡萄糖脫氫酶作用還原NADP+生成NADPH,導(dǎo)340nm光吸收值增測(cè)定340nm吸光度增 速率,即可算SP活性。
            試劑組成和配制:                                                               
            提液液體100mL×1瓶,4℃保存                                                 
            緩沖液液體10mL×1瓶,4℃保存                                                   
            試劑一液體5mL×1瓶,4℃保存                                               
            試劑二液體1.5mL×1支,4℃保存                                                 
            試劑液體1mL×1支,4℃保存                                               
            試劑四粉劑1支,-20℃避光保存,臨用前1mL蒸水溶解                           
            試劑五粉劑1支,-20℃避光保存,臨用前1mL蒸水溶解                           
            試劑粉劑1支,-20℃避光保存,臨用前2mL蒸水溶解                           
            試劑七粉劑1支,-20℃避光保存,臨用前2mL蒸水溶解   
            粗酶液提取:                                                                   
            1、組按照組質(zhì)g提液體(mL) 15~10的比例建議約0.1g組,入1mL提液進(jìn)行冰浴勻漿,然后 10000g,4℃,離心10min,清測(cè)
            2、菌真菌按照胞數(shù)104個(gè)提液體mL500~10001的比例建議500萬(wàn)胞入1mL提液,冰浴超聲波破碎胞率300w,超聲3,間隔7,總時(shí)間3min然后10000g,4℃,離心10min,清置于冰測(cè)       

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