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            首頁   >>   技術文章   >>   HyClone血清沉淀處理與使用建議

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            HyClone血清沉淀處理與使用建議

            閱讀:374      發布時間:2025-4-8
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            以下是針對 HyClone 胎牛血清 的沉淀處理與使用建議的詳細指南,幫助您高效解決問題并確保實驗穩定性:

            一、HyClone血清沉淀的常見類型與判斷

            沉淀類型

            特征

            是否影響實驗

            纖維蛋白絮狀物

            白色絮狀或絲狀漂浮物,37°C可溶解

            通常不影響,過濾后可用

            磷酸鈣結晶

            顯微鏡下可見細微顆粒,解凍后渾濁

            可能干擾光學檢測,建議過濾

            變性蛋白/脂質

            黃色渾濁或塊狀沉淀,37°C不溶解

            可能影響細胞活性,建議停用


            二、HyClone血清沉淀處理步驟

            1. 常規處理方法(適用于正常沉淀)

             解凍與溶解:

            將血清從-20°C轉移至 4°C冰箱過夜緩慢解凍(避免高溫快速解凍)。

            若需快速解凍,可置于 37°C水浴,每隔5分鐘輕輕搖晃,總時間不超過30分鐘。 

            混勻與靜置:

            解凍后輕柔搖勻,避免劇烈震蕩(防止脂蛋白氧化)。

            若有少量絮狀物,將血清在 4°C靜置1-2小時,沉淀會沉至管底。

            分裝上清:

            用無菌移液管小心吸取上清液,避免觸及底部沉淀。

            剩余含沉淀的血清可丟棄或單獨標記備用(如非敏感實驗)。

            2. 過濾處理(針對頑固或敏感實驗) 

            適用場景:干細胞培養、病毒生產、熒光檢測等對純度要求高的實驗。

            操作步驟:

            使用 0.22μm孔徑無菌濾膜(推薦低蛋白吸附材質,如PES膜)。

            在超凈臺中將血清通過濾器緩慢過濾至新無菌管中。

            過濾后分裝,立即凍存。

            3. 異常沉淀處理(疑似變質)

            特征:沉淀無法溶解、血清變色(發紅/發黑)、渾濁或有異味。

            【操作】

            立即停止使用,記錄批號并拍照留存。

            聯系供應商(如Cytiva或授權經銷商)提供質檢報告或退換貨。

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            三、HyClone血清使用建議與預防措施

            1. 分裝與儲存

            分裝體積:按實驗需求分裝為 10ml/管或50ml/管(減少反復凍融次數)。

            凍存條件:-20°C保存(避免-80°Cjiduan溫可能增加沉淀風險)。

            開封后保存:

            4°C短期存放不超過 1個月,使用時避免頻繁取出回溫。

            長期未用完建議重新分裝凍存。

            2. 解凍與混勻技巧

            推薦方法:

            4°C過夜解凍 室溫平衡15分鐘 輕柔旋轉混勻。

            避免操作:

            高溫水浴超過30分鐘(加速蛋白變性)。

            劇烈震蕩或渦旋(導致脂質氧化和泡沫生成)。

            3. 沉淀預防措施

            減少凍融次數:每次凍融可能析出5-10%的沉淀,建議分裝后單次使用。

            避免溫度波動:凍存血清盡量放置于冰箱穩定區域(遠離冰箱門)。

             選擇低沉淀型號:

             型號(如HyClone SH30070)經過超濾處理,沉淀更少。

             γ-照射處理型號(如SV30087)可降低生物負荷,但可能略微增加沉淀。

             四、HyClone血清不同實驗場景的優化建議

            實驗類型

            推薦操作

            注意事項

            常規細胞培養

            直接使用靜置后的上清液

            定期顯微鏡觀察細胞狀態

            干細胞/原代細胞

            必須過濾(0.22μm)或選擇預過濾血清(SH30070

            檢測克隆形成率和分化能力

            熒光定量檢測

            過濾后使用,避免顆粒干擾光信號

            同步設置空白對照(含血清培養基)

            大規模生產

            使用工業級大包裝(如500ml/瓶),分裝前預過濾

            驗證批次一致性


            五、HyClone血清常見問題解答

            Q1:過濾會損失血清中的生長因子嗎?

            答:0.22μm過濾可能截留部分大分子復合物,但對多數生長因子(如EGFFGF)影響較小。若擔心活性損失,可選擇HyClone預過濾血清或減少過濾體積。

            Q2:血清沉淀是否意味質量問題?

            答:少量沉淀(尤其是纖維蛋白)是正常現象,與生產工藝相關,不代表產品失效。需結合細胞生長測試判斷。

            Q3:如何評估新批次血清是否適用?

            答:進行 細胞增殖實驗:

            使用新舊批次血清平行培養細胞(如HEK293)。

             比較細胞貼壁率、倍增時間和形態。

             若差異顯著,聯系供應商協商更換。

            六、緊急情況處理

            細胞突然死亡:立即停用血清,換用已知良好的舊批次或培養基基礎液維持,排查其他污染源(如支原體)。

            批量沉淀問題:聯系HyClone技術支持(Cytiva提交工單),提供批號、儲存條件及沉淀照片。


            通過以上處理與預防措施,可減少HyClone血清沉淀對實驗的影響。如需特定型號的詳細參數或替代方案,請提供實驗具體需求!

             

            HyClone血清代理——天津益元利康生物科技有限公司公司產品線涉及細胞與基因治療、免疫學、分子生物學、細胞生物學等多個方向,專注于生命科學試劑、耗材、細胞、儀器等產品銷售

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