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杭州實(shí)了個(gè)驗(yàn)生物科技有限公司
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二手賽默飛熒光定量PCR儀 Q5 詳盡介紹
一、產(chǎn)品背景
賽默飛世爾科技（Thermo Fisher Scientific）是生命科學(xué)領(lǐng)科研儀器和解決方案提供者，其推出的熒光定量PCR儀（qPCR）系列涵蓋了多種不同性能和應(yīng)用需求的產(chǎn)品。其中，Q5 系列（包括 Q5 和 Q5 plus 等變型）因其在多重檢測(cè)、溫控穩(wěn)定性、軟件交互和自動(dòng)化兼容方面的設(shè)計(jì)，成為實(shí)驗(yàn)室常用設(shè)備之一。
熒光定量PCR技術(shù)自20世紀(jì)90年代以來在分子生物學(xué)、臨床診斷、環(huán)境監(jiān)測(cè)、食品安全、轉(zhuǎn)基因檢測(cè)等領(lǐng)域迅速普及，Q5 系列儀器作為其中的典型產(chǎn)品，提供了穩(wěn)定的擴(kuò)增和實(shí)時(shí)熒光檢測(cè)平臺(tái)。隨著設(shè)備迭代更新，一些科研機(jī)構(gòu)和企業(yè)會(huì)將舊型號(hào)設(shè)備轉(zhuǎn)為二手流通市場(chǎng)，從而降低科研成本、延長(zhǎng)設(shè)備生命周期。
二、熒光定量PCR原理概述
熒光定量PCR（Quantitative Real-Time PCR）是一種結(jié)合傳統(tǒng)PCR擴(kuò)增與實(shí)時(shí)熒光檢測(cè)的技術(shù)。其基本工作流程包括：
模板加樣：將目標(biāo)DNA或cDNA、引物、熒光探針或染料與反應(yīng)混合液加入反應(yīng)孔中。
PCR擴(kuò)增：通過溫度循環(huán)（變性、退火、延伸）實(shí)現(xiàn)特定DNA片段的指數(shù)級(jí)擴(kuò)增。
熒光檢測(cè)：使用熒光染料（如SYBR Green）或探針（如TaqMan）對(duì)擴(kuò)增產(chǎn)物進(jìn)行實(shí)時(shí)監(jiān)測(cè)。
數(shù)據(jù)處理：儀器軟件通過熒光信號(hào)強(qiáng)度計(jì)算閾值周期（Ct值），用于分析模板初始拷貝數(shù)。
Q5 熒光定量PCR儀的設(shè)計(jì)目標(biāo)之一，是在這一過程中確保溫控精確性和光路系統(tǒng)的靈敏度，以獲取準(zhǔn)確的數(shù)據(jù)輸出。
三、Q5 PCR儀的主要技術(shù)參數(shù)
以下是 Q5 儀器常見的核心參數(shù)，僅供參考，實(shí)際配置可能根據(jù)出廠批次和型號(hào)略有不同：
| 項(xiàng)目 | 參數(shù) |
|---|---|
| 通量 | 96孔（標(biāo)準(zhǔn)），可支持384孔（部分型號(hào)） |
| 樣本體積范圍 | 10–100 μL（常見為20–50 μL） |
| 溫控精度 | ±0.25°C |
| 升降溫速率 | 最大 5.0°C/s（依型號(hào)而異） |
| 熒光檢測(cè)通道 | 4–6通道（支持常見染料，如FAM、VIC、ROX、Cy5） |
| 檢測(cè)靈敏度 | 可檢測(cè)低至1拷貝/μL的DNA模板 |
| 軟件功能 | 可實(shí)現(xiàn)絕對(duì)定量、相對(duì)定量、熔解曲線分析、基因分型等 |
| 數(shù)據(jù)導(dǎo)出格式 | 支持.txt、.csv、.xls 等多種格式，便于后期數(shù)據(jù)分析 |
四、功能結(jié)構(gòu)及設(shè)計(jì)要點(diǎn)
1. 溫控模塊
Q5 PCR儀采用半導(dǎo)體熱電控溫技術(shù)（Peltier加熱元件），確保每個(gè)孔內(nèi)溫度一致，減少孔間差異對(duì)結(jié)果的影響。熱蓋設(shè)計(jì)可避免樣本蒸發(fā)，提高擴(kuò)增效率。
2. 熒光檢測(cè)系統(tǒng)
光源為高亮度LED，結(jié)合多通道濾光片，實(shí)現(xiàn)多色同步檢測(cè)。熒光信號(hào)通過高靈敏CCD傳感器接收，自動(dòng)校正背景，提高檢測(cè)準(zhǔn)確性。
3. 用戶界面與軟件
設(shè)備搭配專用分析軟件，界面清晰，支持Ct計(jì)算、標(biāo)準(zhǔn)曲線建立、基因表達(dá)量對(duì)比分析等。部分型號(hào)可通過USB、網(wǎng)絡(luò)連接，實(shí)現(xiàn)遠(yuǎn)程監(jiān)控與控制。
4. 自動(dòng)化兼容性
Q5 儀器支持與液體工作站等自動(dòng)化設(shè)備對(duì)接，在高通量檢測(cè)中可發(fā)揮更大作用。同時(shí)，儀器外殼設(shè)計(jì)緊湊，可適應(yīng)多種實(shí)驗(yàn)臺(tái)和潔凈環(huán)境。
五、常見應(yīng)用領(lǐng)域
1. 臨床分子診斷
檢測(cè)病毒載量（如HBV、HIV）、腫瘤基因表達(dá)水平、遺傳病篩查等。
2. 科研實(shí)驗(yàn)
在分子生物學(xué)、細(xì)胞生物學(xué)、發(fā)育生物學(xué)等領(lǐng)域，用于基因表達(dá)分析、miRNA定量等。
3. 食品與農(nóng)業(yè)
檢測(cè)轉(zhuǎn)基因成分、食品污染物、致病微生物等。
4. 環(huán)境監(jiān)測(cè)
分析水體或土壤中的特定微生物、污染物DNA，輔助環(huán)境質(zhì)量評(píng)估。
六、二手設(shè)備的選購建議
購買二手Q5熒光定量PCR儀時(shí)，應(yīng)注意以下幾個(gè)方面：
1. 設(shè)備來源
確認(rèn)設(shè)備原始用途、維護(hù)記錄以及使用頻率，優(yōu)先選擇來自高?；蚩蒲袡C(jī)構(gòu)的儀器，維護(hù)相對(duì)規(guī)范。
2. 檢測(cè)報(bào)告
要求供應(yīng)方提供近期設(shè)備檢測(cè)報(bào)告，包括溫控測(cè)試、光學(xué)系統(tǒng)測(cè)試、Ct值一致性測(cè)試等。
3. 硬件狀態(tài)
檢查熱蓋、加熱模塊、光學(xué)路徑是否完好，排除腐蝕、積塵、鏡片老化等影響性能的問題。
4. 軟件授權(quán)
確認(rèn)是否包含正版軟件及控制權(quán)限，有些儀器軟件需授權(quán)激活或聯(lián)網(wǎng)注冊(cè)，需提前核實(shí)。
5. 保修與售后
雖然是二手設(shè)備，仍建議選擇提供質(zhì)保期和技術(shù)支持的渠道，避免后續(xù)無法維護(hù)或無法替換配件的情況。
七、使用維護(hù)注意事項(xiàng)
每次使用后應(yīng)清潔樣本托盤和熱蓋，避免殘留影響下次實(shí)驗(yàn)。
定期校準(zhǔn)溫控系統(tǒng)與熒光通道，確保數(shù)據(jù)準(zhǔn)確。
軟件操作時(shí)嚴(yán)格遵守用戶手冊(cè)要求，避免誤操作導(dǎo)致系統(tǒng)故障。
對(duì)使用頻率較高的實(shí)驗(yàn)室，建議設(shè)立維護(hù)日志，記錄設(shè)備運(yùn)行狀態(tài)及異常情況。
八、Q5 與同類設(shè)備對(duì)比（簡(jiǎn)要）
與同類熒光定量PCR儀相比（如ABI QuantStudio、Bio-Rad CFX系列等），Q5 具有以下特點(diǎn)：
溫控均一性較好，適合對(duì)擴(kuò)增效率敏感的實(shí)驗(yàn)；
光路系統(tǒng)設(shè)計(jì)簡(jiǎn)單，日常維護(hù)相對(duì)便捷；
界面操作風(fēng)格直觀，學(xué)習(xí)成本低；
二手市場(chǎng)存量相對(duì)豐富，零部件可替換性強(qiáng)。
但同時(shí)也存在一些限制，如部分老型號(hào)軟件更新不及時(shí)，部分功能如高階熔解曲線分析需額外模塊支持等。
九、總結(jié)
二手賽默飛 Q5 熒光定量PCR儀作為一款經(jīng)典的實(shí)時(shí)定量擴(kuò)增檢測(cè)平臺(tái)，在科研及檢測(cè)應(yīng)用中具有一定實(shí)用價(jià)值。通過合理選擇、規(guī)范維護(hù)，其仍可滿足日?；蚨糠治龅亩鄶?shù)需求。對(duì)于預(yù)算有限或在構(gòu)建初期實(shí)驗(yàn)室的用戶而言，是一項(xiàng)具有性價(jià)比的設(shè)備選擇。
