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杭州實(shí)了個(gè)驗(yàn)生物科技有限公司
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二手賽默飛熒光定量PCR儀（QuantStudio系列）應(yīng)用與技術(shù)綜述
一、熒光定量PCR技術(shù)背景
熒光定量PCR（Quantitative Real-Time PCR，簡(jiǎn)稱qPCR）是一種利用熒光染料或探針技術(shù)實(shí)現(xiàn)核酸擴(kuò)增過程實(shí)時(shí)監(jiān)控與定量分析的分子生物學(xué)工具。通過對(duì)熒光信號(hào)變化進(jìn)行采集與解析，qPCR能在每個(gè)循環(huán)階段對(duì)靶標(biāo)DNA或RNA的數(shù)量進(jìn)行定量判斷，廣泛應(yīng)用于生命科學(xué)研究、醫(yī)學(xué)診斷、食品安全、生物制藥及疾病監(jiān)測(cè)等領(lǐng)域。
賽默飛（Thermo Fisher Scientific）旗下的Applied Biosystems品牌開發(fā)了一系列熒光定量PCR系統(tǒng)（如QuantStudio 3、5、7、12K Flex等），在實(shí)驗(yàn)通量、檢測(cè)靈敏度和系統(tǒng)操作性上不斷優(yōu)化，適應(yīng)不同層次科研與檢測(cè)實(shí)驗(yàn)室的核酸檢測(cè)需求。
二、QuantStudio系列主要型號(hào)介紹
1. QuantStudio 3
檢測(cè)通道：4通道光學(xué)系統(tǒng)（適配SYBR、FAM、VIC、ROX）
通量：96孔標(biāo)準(zhǔn)板
適用對(duì)象：日常教學(xué)實(shí)驗(yàn)、低通量實(shí)驗(yàn)室、初創(chuàng)平臺(tái)
操作方式：支持本機(jī)觸控屏控制或計(jì)算機(jī)軟件控制
備注：適合日常基因表達(dá)分析、樣品篩查等基礎(chǔ)實(shí)驗(yàn)任務(wù)
2. QuantStudio 5
檢測(cè)通道：4通道或6通道可選
通量：96孔板，部分版本支持384孔
適用場(chǎng)景：通量適中科研組、臨床前研究平臺(tái)
功能特點(diǎn)：集成Wi-Fi遠(yuǎn)程管理功能，具備軟件權(quán)限分級(jí)管理
軟件配套：Design & Analysis v2.6及云端平臺(tái)
3. QuantStudio 7 Flex
通量：支持96孔、384孔和TaqMan Array卡（靈活更換樣本塊）
檢測(cè)能力：可擴(kuò)展至高通量快速模式
適用場(chǎng)景：大型實(shí)驗(yàn)室、檢測(cè)機(jī)構(gòu)、高密度樣本篩查
特點(diǎn)：光路系統(tǒng)優(yōu)化，提升邊緣孔檢測(cè)穩(wěn)定性
4. QuantStudio 12K Flex
通量：最高支持12,000個(gè)數(shù)據(jù)點(diǎn)/運(yùn)行（使用OpenArray技術(shù)）
用途：大規(guī)模遺傳篩查、藥物反應(yīng)性分析、群體基因表達(dá)測(cè)定
備注：集成多種擴(kuò)展模塊，適合進(jìn)行個(gè)體化醫(yī)學(xué)研究
三、關(guān)鍵技術(shù)參數(shù)總覽
| 參數(shù)指標(biāo) | QuantStudio 3 | QuantStudio 5 | QuantStudio 7 Flex |
|---|---|---|---|
| 光學(xué)檢測(cè)通道 | 4通道 | 4或6通道 | 最多6通道 |
| 樣本通量 | 96孔 | 96孔或384孔 | 96孔/384孔/Array卡 |
| 反應(yīng)體系體積 | 10–100 μL | 10–100 μL | 5–100 μL |
| 熒光檢測(cè)靈敏度 | < 10個(gè)拷貝/反應(yīng) | < 5個(gè)拷貝/反應(yīng) | < 5個(gè)拷貝/反應(yīng) |
| 動(dòng)態(tài)檢測(cè)范圍 | 9個(gè)數(shù)量級(jí) | 10個(gè)數(shù)量級(jí) | 10個(gè)數(shù)量級(jí) |
| 數(shù)據(jù)導(dǎo)出格式 | CSV、Excel、PDF等 | 同左 | 同左 |
| 支持染料 | SYBR、TaqMan、EvaGreen 等 | ||
| 校準(zhǔn)方式 | 自動(dòng)或半自動(dòng) | 自動(dòng) | 自動(dòng)/用戶自定義 |
| 控制方式 | 本機(jī)或PC連接 | 本機(jī)+PC+云端 | PC/服務(wù)器/網(wǎng)絡(luò)集中控制 |
四、典型應(yīng)用場(chǎng)景
基因表達(dá)分析：對(duì)多個(gè)樣本中的mRNA水平進(jìn)行比較，評(píng)估基因調(diào)控狀況。
病原檢測(cè)：病毒、細(xì)菌、支原體等微生物核酸定量分析，如、流感等病毒篩查。
拷貝數(shù)變異分析（CNV）：用于基因組結(jié)構(gòu)變異檢測(cè)，適用于腫瘤、遺傳性疾病分析。
突變檢測(cè)與SNP分型：配合TaqMan探針，進(jìn)行點(diǎn)突變、高通量遺傳篩查。
微RNA分析：在較小RNA片段中進(jìn)行差異表達(dá)研究。
食品安全與轉(zhuǎn)基因成分檢測(cè)：檢測(cè)GMO成分、致病菌殘留等。
藥物研發(fā)與反應(yīng)預(yù)測(cè)：評(píng)價(jià)藥物在不同人群中的代謝基因表達(dá)情況。
五、二手設(shè)備配置與檢測(cè)流程
我們常見的二手QuantStudio儀器通常包括以下組件：
主機(jī) × 1（已檢測(cè)光路、電控、散熱系統(tǒng)）
原裝或兼容電源線 × 1
軟件操作指南 × 1（電子或紙質(zhì)）
預(yù)裝操作系統(tǒng) + USB接口 × 若干
模塊加熱塊（按型號(hào)選配）
出廠檢測(cè)報(bào)告、驗(yàn)證記錄（如提供）
檢測(cè)流程標(biāo)準(zhǔn)包括：
熱模塊均勻性校驗(yàn)（溫差≤ ±0.25°C）
熒光通道對(duì)比實(shí)驗(yàn)（使用標(biāo)準(zhǔn)染料）
循環(huán)控制系統(tǒng)連續(xù)運(yùn)行穩(wěn)定性測(cè)試
通信端口（USB、LAN）響應(yīng)測(cè)試
軟件兼容性驗(yàn)證（Windows環(huán)境下運(yùn)行）
六、設(shè)備選型建議
| 實(shí)驗(yàn)類型 / 機(jī)構(gòu)類型 | 推薦型號(hào) | 建議理由 |
|---|---|---|
| 教學(xué)單位 | QuantStudio 3 | 功能簡(jiǎn)潔，適合基礎(chǔ)教學(xué)和學(xué)生實(shí)訓(xùn) |
| 醫(yī)療機(jī)構(gòu)檢驗(yàn)科 | QuantStudio 5 | 支持云端操作，便于數(shù)據(jù)集中管理 |
| 藥企研發(fā)平臺(tái) | QuantStudio 7 Flex | 通量適中，支持模塊更換 |
| 遺傳篩查實(shí)驗(yàn)室 | QuantStudio 12K Flex | 支持大規(guī)模樣本并行檢測(cè) |
| 生物初創(chuàng)企業(yè) | QuantStudio 3或5 | 成本控制下滿足基礎(chǔ)應(yīng)用需求 |
七、使用與維護(hù)建議
實(shí)驗(yàn)前校準(zhǔn)通道靈敏度：可通過染料參考板比對(duì)信號(hào)線性，防止通道偏差。
預(yù)熱與降溫過程遵循規(guī)范：盡量避免頻繁開關(guān)機(jī)以保護(hù)Peltier組件。
定期軟件升級(jí)：確保與最新的染料數(shù)據(jù)庫(kù)兼容，并修復(fù)潛在漏洞。
數(shù)據(jù)定期備份：運(yùn)行結(jié)束后建議立即備份數(shù)據(jù)，避免誤刪或系統(tǒng)異常。
使用專用板與封板膜：避免使用不匹配耗材引起孔間污染或信號(hào)漂移。
清潔維護(hù)注意防塵：定期清理散熱風(fēng)口、鏡頭及濾光片區(qū)域。
八、關(guān)于采購(gòu)二手PCR設(shè)備的建議
關(guān)注設(shè)備年份與運(yùn)行時(shí)間：合理評(píng)估系統(tǒng)使用壽命與維護(hù)頻率。
優(yōu)先選擇保養(yǎng)記錄完整的設(shè)備：設(shè)備使用歷史清晰，有助于后續(xù)追蹤問題。
要求出廠檢測(cè)報(bào)告：確保熱循環(huán)系統(tǒng)、光學(xué)系統(tǒng)、控制系統(tǒng)運(yùn)作正常。
核實(shí)軟件兼容性：確認(rèn)是否支持當(dāng)前實(shí)驗(yàn)室操作系統(tǒng)（如Windows 10）。
售后服務(wù)與配件匹配：如無(wú)維護(hù)渠道，建議選擇有本地技術(shù)支持的商家。
九、總結(jié)
賽默飛熒光定量PCR儀（QuantStudio系列）涵蓋從基礎(chǔ)科研到高通量篩查的多種實(shí)驗(yàn)需求。二手設(shè)備在功能完整、性能達(dá)標(biāo)的前提下，為實(shí)驗(yàn)室提供了較靈活的預(yù)算控制方案。通過規(guī)范的檢測(cè)流程、明確的應(yīng)用匹配、合理的使用方式，可以實(shí)現(xiàn)科學(xué)、高效的核酸定量分析工作。
