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一、引言
隨著分子生物學技術的不斷發展,實時熒光定量PCR(qPCR)已成為基因表達分析、病原體檢測、SNP 分型、拷貝數變異等研究和臨床診斷的重要工具。羅氏(Roche)生產的實時熒光定量PCR儀以其穩定的溫度控制系統、靈敏的熒光探測模塊以及完善的軟件平臺而獲得廣泛認可。本文圍繞一臺二手羅氏實時熒光定量PCR儀,從設備概覽、主要性能、技術優勢、典型應用、操作維護、使用案例和售后支持等方面進行詳細介紹。
二、設備概覽
二手羅氏實時熒光定量PCR儀保留了原廠出廠時的全部核心組件,采用了模塊化設計。儀器外觀結構與全新機型一致,由機箱主機、光學檢測系統、觸摸屏控制單元以及配套電源組成。主機內部包括精準的熱循環模塊和多通道熒光探測器,可支持 FAM、HEX/VIC、ROX、Cy5 等常見熒光染料。配合羅氏專用軟件,可一次性檢測多達 96 個樣本,每個樣本可進行 1–5 個通道的數據采集與分析。
三、主要性能參數
溫控精度: ±0.1 ℃;
溫度均一性: ≤ 0.3 ℃;
升降溫速率: 5 ℃/s(從 60 ℃ 到 95 ℃);
光學通道: 4 通道;
檢測靈敏度: 可檢出單拷貝水平的核酸;
通量: 96 孔板,支持半板、條管以及單管檢測;
重復性: Ct 值標準差 ≤ 0.1;
數據輸出: CSV、PDF、Excel、圖表等多種格式;
軟件功能: 定性/定量分析、熔解曲線分析、相對定量、絕對定量、SNP 分型等。
四、技術優勢
精確溫控系統
采用雙閉環 PID 算法,實時監控模塊溫度,保證反應過程中溫度偏差最小化;
多點溫度反饋設計,自動校準溫差,增強檢測重復性。
多通道熒光檢測
光電探測器靈敏度高,自動背景扣除,信噪比達 1:1000;
通道切換速度快,熒光信號采集時延低于 10 ms。
軟件平臺
界面簡潔;反應設置向導化,減少操作失誤;
支持直觀的實時擴增曲線、標準曲線及熔解曲線分析;
內置多種分析模板,可自定義報告內容及格式。
模塊化設計
可更換光源燈泡與探測器模塊,維修時無需更換整機;
通用電源接口,適應寬電壓環境。
五、典型應用場景
基因表達定量
利用熒光標記引物或探針,精準評估基因在不同組織或處理條件下的表達差異;
病原體快速檢測
新冠病毒、流感病毒、結核分枝桿菌等病原微生物的定性與定量檢測;
轉基因作物檢測
檢測樣本中轉基因片段的存在與數量;
SNP 分型與拷貝數變異
配合特異性探針,實現單核苷酸多態性位點分型與拷貝數差異檢測;
臨床診斷與科研
腫瘤標志物檢測、脫氧核糖核酸甲基化分析、miRNA 表達譜研究等。
六、操作與維護
日常開機檢查
檢查電源線與機箱接口是否緊固;
打開軟件,查看系統自檢結果;
試劑和耗材
建議使用羅氏或經授權的兼容品牌試劑盒;
96 孔板、光學封板膜應選用低熒光漂白材料;
日常清潔
定期用 70% 乙醇清潔樣本架與蓋板;
光學窗口每月檢查一次,如有塵埃用專業鏡頭紙擦拭;
定期校準
建議每半年進行溫度與熒光系統校準;
可聯系專業技術服務商或實驗室內部質控組執行;
故障處理
軟件出現異常時,可重啟主機或重新安裝軟件;
硬件報警提示時,可參考說明書或聯系售后支持。
七、二手設備驗收要點
外觀檢查: 無明顯磕碰、劃痕;機箱固定螺絲完好;
溫控測試: 可通過標準試劑盒或 DNA Ladder 驗證升降溫速率及均一性;
熒光靈敏度測試: 使用低濃度熒光標準品檢測信號變化曲線;
軟件運行: 載入模板、編輯程序、導出報告功能正常;
質保與配件: 確認賣方提供的質保期限、電源線、通信線、光學封板膜等附件是否齊全。
八、典型用戶案例
高校科研實驗室
某大學生命科學學院購入此機型,用于多部門聯合項目,平均每周運行 20 次以上,設備穩定運行超過兩年,Ct 值重現性良好。第三方檢測機構
某檢測中心作為二手回購機型,引入用于食品安全微生物檢測,月均通量可達 500 板次,高通量檢測任務下表現出色。臨床檢驗室
地市級醫院分子實驗室使用該儀器開展呼吸道病毒核酸監測,并通過 ISO/IEC 17025 認證審核。
九、質量保證與售后支持
質保范圍
核心部件(熱循環模塊、光學模塊)承諾 6 個月質保;
其他配件質保 3 個月,質保期內免費更換損壞部件;
技術培訓
提供儀器安裝、使用和日常維護培訓;
包含軟件操作與常見故障排查指導;
遠程支持
配備遠程診斷軟件,可實時監控儀器運行狀態;
一線工程師在線解答及指導;
現場服務
在簽署服務協議后,48 小時內安排工程師上門服務(限國內主要城市);
提供定期保養與校準服務套餐。
十、總結
二手羅氏實時熒光定量PCR儀憑借其精準的溫控系統、靈敏的熒光檢測能力和完善的軟件分析平臺,能夠滿足科研、臨床及第三方檢測等多種需求。在保證儀器性能的前提下,二手采購不僅節省投入成本,也可快速上機開展實驗。通過嚴格的驗收流程、規范的日常維護及完善的售后服務,使用者可確保長期穩定運行,為科研與生產提供可靠的數據支持。