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杭州實了個驗生物科技有限公司
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瀏覽次數(shù)一、產(chǎn)品概述
Roche LightCycler 480 是一款適用于中高通量實驗室的實時熒光定量 PCR（qPCR）平臺，支持 96 孔和 384 孔板兩種格式。其模塊化設計結合高精度溫控與多通道熒光檢測，可靈活配置實驗方案，并兼容多種熒光染料和探針。LightCycler 480 廣泛應用于基因表達分析、病原體檢測、表觀遺傳學研究、SNP 分型及拷貝數(shù)變異檢測等領域。
二、系統(tǒng)架構與硬件組成
機箱與尺寸
外殼采用金屬與抗腐蝕涂層，尺寸約 50 cm×58 cm×54 cm，適合實驗臺或安裝架放置；
凈重約 30 kg，設計有可拆卸頂蓋，便于維護與清潔。
溫控模塊
半導體制冷加熱（Peltier）技術，支持 4 °C–99 °C 溫度范圍；
溫度控制精度 ±0.1 °C，均一性 ≤ 0.2 °C；
升溫速率最高可達 4 °C/s，降溫速率約 3 °C/s。
光學檢測單元
激發(fā)源：多色 LED，包括藍（470 nm）、綠（530 nm）、黃（590 nm）和紅（630 nm）光區(qū)；
檢測器：光電二極管陣列（PMT），信噪比可達 1:1000；
通道切換：自動濾光片切換，延遲 < 8 ms；
支持 FAM、HEX/VIC、ROX/TAMRA、Cy5、Cy3 等多種染料組合。
板式適配
標配 96 孔板架；可選配 384 孔板適配器，單次檢測量提升 4 倍；
兼容條管、單管及定制微流控芯片。
控制與接口
高分辨率觸摸屏面板，實時顯示擴增曲線與熔解曲線；
PC 端軟件通過 USB 2.0、LAN 或 RS-232 接口連接；
支持遠程監(jiān)控與實驗室信息管理系統(tǒng)（LIMS）對接。
三、關鍵性能指標
| 性能指標 | 技術參數(shù) |
|---|---|
| 溫度控制精度 | ±0.1 °C |
| 溫度均一性 | ≤ 0.2 °C |
| 最大升溫速率 | 4 °C/s |
| 最大降溫速率 | 3 °C/s |
| 熒光通道數(shù) | 最多 5 通道（可選） |
| 檢測靈敏度 | 單拷貝水平 |
| 定量線性范圍 | 101–10? copies |
| 線性回歸系數(shù) (R2) | ≥ 0.995 |
| 板式通量 | 96 孔/板（標配），384 孔/板（選配） |
| 數(shù)據(jù)輸出格式 | CSV、Excel、PDF、JPEG、PNG |
| 通訊接口 | USB 2.0 ×2，LAN ×1，RS-232 ×1 |
| 電源要求 | AC 100–240 V，50/60 Hz |
| 工作環(huán)境 | 溫度 15–30 °C，濕度 20–80% （無冷凝） |
| 功耗 | 工作時 ≤ 250 W；待機 ≤ 10 W |
四、軟件平臺與數(shù)據(jù)分析
實驗設計
向?qū)浇缑嬉龑гO置板架布局、引物/探針通道及擴增程序；
支持梯度 PCR 設計，一次試驗可同時測試 6–12 個退火溫度；
模板管理功能，可保存、導入、導出實驗模板，減少重復操作。
實時監(jiān)控
實時擴增曲線與 Ct 值自動計算；
多種顯示模式（疊加模式、分組對比模式）便于多板實驗評估；
實時熔解曲線、熒光強度變化曲線。
數(shù)據(jù)處理
定性分析：閾值循環(huán)數(shù)（Ct）判定，自動篩選異常點；
相對定量：ΔΔCt 法或 Pfaffl 法，預設多種內(nèi)參基因庫；
絕對定量：標準曲線法，支持自動繪制并擬合；
多重分析：不同通道熒光分離，支持最多 4–5 重檢測；
熔解曲線分析：可視化產(chǎn)物特異性，檢測引物二聚體或非特異擴增。
報告與導出
自定義報告模板，包含實驗信息、圖表和統(tǒng)計匯總；
批量導出功能，一鍵生成多實驗報告；
數(shù)據(jù)加密與用戶權限管理，滿足 GLP/GMP 規(guī)范需求。
五、典型應用領域
基因表達定量
適用于細胞因子、受體、轉錄因子等基因表達差異分析；
熒光染料與探針雙重標記，針對低豐度轉錄本也可獲得穩(wěn)定 Ct 值。
病原體核酸檢測
病毒、細菌、真菌等病原微生物定性與定量；
可配置快速擴增程序，初步結果可在 30–40 min 內(nèi)獲取。
拷貝數(shù)變異與 SNP 分型
使用 TaqMan 探針或 HRM（高分辨率熔解曲線）技術；
定量檢測基因組擴增或缺失事件，支持 CNV 分析；
基于熔解曲線差異識別單核苷酸多態(tài)性（SNP）。
表觀遺傳學分析
甲基化特異 PCR（MSP）與甲基化敏感探針分析；
結合亞硫酸鹽轉換后 DNA，定量評估甲基化水平。
轉基因及 GMO 檢測
針對常見轉基因片段（35S、NOS、Bar 等）進行定量；
符合食品安全和監(jiān)管機構標準，如 ISO 21569。
六、日常操作與維護
開關機流程
開機：連接電源與網(wǎng)絡，啟動軟件后執(zhí)行系統(tǒng)自檢；
關機：在軟件中安全退出后斷電，避免數(shù)據(jù)丟失。
試劑與耗材
推薦使用低漂白或無漂白板材及專用封板膜；
熒光探針、引物等反應體系需在 ?20 °C 存儲并在室溫平衡后使用。
清潔與消毒
每次實驗后，用無塵布或鏡頭紙擦拭光學窗口；
定期用 70% 乙醇擦拭樣本架底板及蓋板；
避免液體進入機箱風道和電子部件。
校準與質(zhì)控
溫度校準：每 6 個月使用校準板或標準試劑驗證；
光學校準：采用標準熒光染料，檢查各通道靈敏度與線性度；
軟件更新：定期檢查并安裝新版固件與分析軟件。
故障排查
軟件錯誤：參考日志文件或重安裝軟件；
硬件報警：根據(jù)錯誤代碼手冊執(zhí)行清潔或更換部件；
無法升溫或溫差過大：檢查 Peltier 模塊及散熱風扇。
七、二手設備驗收要點
外觀與機械部件
檢查機箱無明顯碰撞痕跡；
樣本架與蓋板運動順暢，無卡滯。
溫控與光學測試
執(zhí)行標準梯度 PCR，記錄升降溫曲線與均一性；
利用熒光板及陰性對照檢測信噪比與線性范圍。
軟件功能驗證
創(chuàng)建新實驗、加載模板、運行擴增并導出報告；
檢查網(wǎng)絡連接和遠程監(jiān)控功能。
配件與文檔
樣本架、封板膜、電源線、通信線、軟件授權文件齊全；
提供最近一次校準報告及使用手冊。
八、典型用戶案例
大學與研究所：
在腫瘤標志基因表達分析項目中，同步比較 20+ 個基因，月平均運行 200 板次，結果重現(xiàn)性良好。第三方檢測機構：
用于轉基因作物成分定量分析，滿足 ISO/IEC 17025 認證。公共衛(wèi)生實驗室：
實施呼吸道病原體監(jiān)測，流感高峰期單日檢測可達 800 例樣本。
九、采購及配件建議
通量選擇
日常通量 < 50 板/月：標準 96 孔版；
通量 > 200 板/月：建議選配 384 孔適配器及自動上板裝置。
配件選配
梯度模塊：用于引物退火溫度優(yōu)化；
自動化接口：與液體處理機器人對接，減少手動操作。
軟件授權
標配基礎分析模塊；
可選 LIMS 接口、統(tǒng)計插件（PCA、聚類分析等）。
預算考量
全新機型與二手設備在初期投入有差異；
建議根據(jù)項目周期與預算綜合評估。
十、售后與技術支持
質(zhì)保期
核心部件（溫控、光學） 6 個月；
耗材及附件 3 個月。
培訓服務
包括儀器安裝、軟件操作、日常維護與故障排查；
可安排現(xiàn)場或遠程培訓。
技術支持
遠程診斷：實時監(jiān)控運行狀態(tài)；
現(xiàn)場服務：簽訂協(xié)議后 48 小時內(nèi)響應（限主要城市）；
定期校準與升級服務套餐亦可選購。
通過系統(tǒng)化的硬件設計、軟件功能和多領域應用驗證，LightCycler 480 能滿足科研、臨床及檢測機構的多種需求。
