《中國藥典》2020版 已經(jīng)正式實(shí)施，關(guān)于農(nóng)殘檢測(cè)有很大變化，主要是通則2341增加了第五法禁用農(nóng)藥的檢測(cè)方法，隨著藥典的實(shí)施，植物類中藥及飲片中不得檢出33種（55個(gè)）目標(biāo)物，很多中藥企業(yè)都在開始開展這個(gè)實(shí)驗(yàn)，但是很多老師在實(shí)驗(yàn)第yi步，選擇標(biāo)準(zhǔn)品這一部分就被難住了，市場(chǎng)上很多種混合對(duì)照品，那應(yīng)該如何合理選擇呢？今天小編進(jìn)行了一些問題整理，希望可以幫助大家。

01 我們要檢測(cè)的農(nóng)藥目標(biāo)物有哪些？

相信很多老師通過對(duì)藥典的解讀也都有所發(fā)現(xiàn)，中藥材禁用農(nóng)藥的檢測(cè)涉及到33種農(nóng)藥，因包含同分異構(gòu)體和代謝產(chǎn)物等，總計(jì)共55個(gè)目標(biāo)物；根據(jù)檢測(cè)儀器又分為了氣質(zhì)質(zhì)檢測(cè)組，35個(gè)；液質(zhì)質(zhì)檢測(cè)組，31個(gè)；其中11個(gè)目標(biāo)物可以同時(shí)使用兩種儀器檢測(cè)。具體情況見下表：

02 市場(chǎng)上有哪些商品化的中藥禁用農(nóng)殘混合對(duì)照品溶液？

目前市場(chǎng)上許多廠家都推出了針對(duì)《中國藥典》2020版 通則2341第五法的定制化混標(biāo)產(chǎn)品，按照分組和濃度情況可以分為以下幾類：

①、按照目標(biāo)物的檢測(cè)儀器分類，主要分為3種產(chǎn)品，分別是針對(duì)GC-MS/MS檢測(cè)的35種農(nóng)藥混標(biāo)、針對(duì)LC-MS/MS檢測(cè)的31種農(nóng)藥混標(biāo)、針對(duì)所有目標(biāo)物的55種禁用農(nóng)藥混標(biāo)。

②、按照目標(biāo)物濃度分類，主要分為2種產(chǎn)品，一種是所有目標(biāo)物濃度都相同的混標(biāo)產(chǎn)品，此類產(chǎn)品的濃度通常有10ppm和100ppm；另外一種是所有目標(biāo)物濃度不*相同的混標(biāo)產(chǎn)品，此類產(chǎn)品的濃度通常為2-20ppm或20-200ppm。

《中國藥典》2020版 通則0212中對(duì)于植物類中藥材中禁用農(nóng)藥的限值是不*相同的，因此，以上各種混標(biāo)產(chǎn)品中chang見的當(dāng)屬不同濃度的混標(biāo)產(chǎn)品，此類產(chǎn)品通常是根據(jù)藥典標(biāo)準(zhǔn)中的限值要求進(jìn)行倍數(shù)擴(kuò)大配制得到。下面以安譜實(shí)驗(yàn) CDAA-M-490407-TX-1.2ml 55種農(nóng)藥混合對(duì)照溶液產(chǎn)品為例進(jìn)行簡(jiǎn)單介紹。下圖是混合對(duì)照溶液的濃度和CAS號(hào)信息。

從表中可以看出，混合對(duì)照品溶液的濃度范圍為2-20ppm，其中大部分目標(biāo)物的濃度都是依據(jù)藥典限值要求進(jìn)行了200倍的擴(kuò)大，但涉及到同分異構(gòu)體和代謝物的農(nóng)藥時(shí)會(huì)存在一些差異，因?yàn)檫@些目標(biāo)物的限值是2-4個(gè)物質(zhì)的和，例如表中四個(gè)六六六的濃度均為10mg/L，為限值0.1mg/kg的100倍；甲ban磷、甲ban磷砜和甲ban磷亞砜三個(gè)物質(zhì)的濃度均為4mg/L，為限值0.02mg/kg的200倍。因?yàn)樗幍渲胁⑽匆?guī)定對(duì)照品溶液的具體濃度，不同廠家生產(chǎn)的混合對(duì)照品溶液中對(duì)于此類以和計(jì)限值的農(nóng)藥目標(biāo)物，其具體濃度設(shè)定可能不*相同，因此大家在購買后一定要對(duì)其COA證書進(jìn)行仔細(xì)閱讀，確定每個(gè)目標(biāo)物的濃度信息。

03 標(biāo)準(zhǔn)曲線的濃度是多少，如何進(jìn)行配制？

藥典標(biāo)準(zhǔn)中對(duì)于對(duì)照品溶液的制備要求如下圖所示，標(biāo)準(zhǔn)要求使用基質(zhì)標(biāo)準(zhǔn)曲線，給出了配制標(biāo)準(zhǔn)曲線的體積信息，但并沒有給出具體的濃度信息。

下表中給出55種禁用農(nóng)藥混合對(duì)照品溶液的一種標(biāo)曲配制濃度信息表，僅供大家參考，各位老師可以根據(jù)自己的實(shí)際情況進(jìn)行標(biāo)曲濃度的設(shè)定。

表中使用商品化的2-20ppm混合標(biāo)準(zhǔn)品，使用時(shí)可以按照標(biāo)準(zhǔn)要求，取1mL標(biāo)準(zhǔn)品溶液，用乙腈定容至20mL得到配制標(biāo)準(zhǔn)曲線使用的混合對(duì)照品貯備溶液（0.1-1ppm），然后根據(jù)藥典標(biāo)準(zhǔn)方法，分別取10、20、50、100、150、200μL的貯備溶液進(jìn)行基質(zhì)標(biāo)準(zhǔn)曲線的配制。

如果使用更高濃度的商品化的20-200ppm混合標(biāo)準(zhǔn)品，使用時(shí)則需要注意濃度信息，不可按照藥典標(biāo)準(zhǔn)方法進(jìn)行配制，只需準(zhǔn)確量取0.1mL標(biāo)準(zhǔn)品溶液，用乙腈定容至20mL得到配制標(biāo)準(zhǔn)曲線使用的混合對(duì)照品貯備溶液（0.1-1ppm），然后根據(jù)藥典標(biāo)準(zhǔn)方法，分別取10、20、50、100、150、200μL的貯備溶液進(jìn)行基質(zhì)標(biāo)準(zhǔn)曲線的配制。

按照上述的標(biāo)線配制方法，使用直接提取法（包含固相萃取法）時(shí)，通則0212規(guī)定的目標(biāo)物限值對(duì)應(yīng)的濃度是標(biāo)線第3點(diǎn)（50μL）；使用QuEChERs方法時(shí)，通則0212規(guī)定的目標(biāo)物限值對(duì)應(yīng)的濃度是標(biāo)線第4點(diǎn)（100μL）。

04 加標(biāo)實(shí)驗(yàn)如何開展，需要的加標(biāo)濃度是多少？

通則2341第五法中要求55個(gè)目標(biāo)物的回收率在70%-120%，因此日常檢測(cè)實(shí)驗(yàn)中需要開展加標(biāo)回收率實(shí)驗(yàn)。加標(biāo)實(shí)驗(yàn)即在樣品粉碎稱重后，向樣品粉末中加入適量的混合標(biāo)準(zhǔn)品溶液，混勻后按照供試品溶液的處理方法同時(shí)處理。

加標(biāo)濃度建議按直接提取法（包含固相萃取法）和QuEChERs法進(jìn)行分類：

直接提取法（包含固相萃取法）：

1、取0.5mL 20-200ppm的混標(biāo)溶液，乙腈稀釋至10mL，得到1-10ppm的加標(biāo)用混合標(biāo)準(zhǔn)使用溶液。

2、稱取5.0g 樣品后，加入0.05mL 1-10ppm混標(biāo)使用溶液（e.g. 水胺硫磷為5ppm），經(jīng)前處理后，供試品溶液的上機(jī)濃度5-50ppb（e.g. 水胺硫磷為25ppb）。

3、因?yàn)橹苯犹崛》ńY(jié)合固相萃取法的供試品溶液為2-5mL，所以1個(gè)樣品的供試品溶液可以分別供GC-MS/MS和LC-MS/MS的檢測(cè)需求。所以建議使用55種禁用農(nóng)藥的混合標(biāo)準(zhǔn)品溶液，這樣可以減少一半的實(shí)驗(yàn)量，提高工作效率。

QuEChERs：

1、取0.5mL 20-200ppm的混標(biāo)溶液，乙腈稀釋至10mL，得到1-10ppm的加標(biāo)用混合標(biāo)準(zhǔn)使用溶液。

2、稱取3.0g 樣品后，加入0.03mL 1-10ppm混標(biāo)使用溶液（e.g. 水胺硫磷為5ppm），經(jīng)前處理后，供試品溶液的上機(jī)濃度10-100ppb（e.g. 水胺硫磷為50ppb）。

3、因?yàn)镼uEChERs方法的供試品溶液只有1mL，而GC-MS/MS需要加入0.3mL內(nèi)標(biāo)溶液，LC-MS/MS的檢測(cè)需要加入0.3mL純水，所以1個(gè)樣品的供試品溶液只能供一臺(tái)儀器的檢測(cè)需求。所以建議使用分組的混合標(biāo)準(zhǔn)品溶液，GC-MS/MS組35種禁用農(nóng)藥混合標(biāo)準(zhǔn)品溶液、LC-MS/MS組31種禁用農(nóng)藥混合標(biāo)準(zhǔn)品溶液。

以上加標(biāo)方法僅為建議方法，各位老師也可以根據(jù)需求自行進(jìn)行調(diào)整。例如使用QuEChERs方法也可以使用55種的禁用農(nóng)藥混標(biāo)，只需要做兩組加標(biāo)樣品，分別供GC-MS/MS和LC-MS/MS檢測(cè)即可。

05 11種重復(fù)的化合物有推薦的檢測(cè)方法嗎?

55種禁用農(nóng)藥中同時(shí)可以使用GC-MS/MS和LC-MS/MS檢測(cè)的化合物有久xiao磷、殺chong脒、苯xian磷、蠅du磷、zhi螟磷、甲ban磷、甲基yi柳磷、內(nèi)xi磷（O+S）、滅xian磷和水胺硫磷共11個(gè)目標(biāo)物。

這11個(gè)目標(biāo)物選擇檢測(cè)儀器的原則是目標(biāo)物的響應(yīng)和回收率，不同基質(zhì)可能選擇情況并不相同，主要是選擇一種響應(yīng)較好，回收率符合要求的方法，兩種儀器只要選擇一種即可。

其中內(nèi)xi磷（O+S）建議選擇LC-MS/MS檢測(cè)，因?yàn)閮?nèi)xi磷（O+S）在氣質(zhì)上出兩個(gè)峰，而在液質(zhì)上出一個(gè)峰，方便計(jì)算。

苯xian磷建議選擇LC-MS/MS檢測(cè)，因?yàn)闅赓|(zhì)質(zhì)只可檢測(cè)苯xian磷，而液質(zhì)質(zhì)可檢測(cè)苯xian磷、苯xian磷砜和苯xian磷亞砜三個(gè)目標(biāo)物。

殺chong脒建議優(yōu)先選擇LC-MS/MS，因?yàn)镚C-MS/MS檢測(cè)基質(zhì)干擾相對(duì)較多；水胺硫磷建議優(yōu)先選擇GC-MS/MS，因?yàn)長(zhǎng)C-MS/MS檢測(cè)基質(zhì)干擾相對(duì)較多。

以上選擇僅為建議方法，中藥基質(zhì)非常復(fù)雜，種類繁多，各位老師終還是要根據(jù)基質(zhì)和前處理方法的實(shí)際情況進(jìn)行儀器的選擇。

以上是小編關(guān)于《中國藥典》2020版 通則2341第五法 33種禁用農(nóng)藥檢測(cè)用標(biāo)準(zhǔn)品的一些問題和建議，希望可以幫助各位老師和同仁更加清晰地了解標(biāo)準(zhǔn)，更加方便快速地開展實(shí)驗(yàn)。