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水產品中呋喃唑酮殘留量的測定--液相色譜法
| 1.范圍 5. 儀器和設備 5.1 液相色譜儀，配有紫外檢測器。 5.2 高速組織搗碎機。 5.3 旋轉蒸發儀。 5.3 離心機。 5.4 振蕩器。 5.5 蒸發燒瓶，具塞。 5.6 刻度離心管。 5.7 膜孔濾器：0.45μm。 6.色譜條件 6.1 色譜柱：C18柱, 250mm×4.6mm（id），粒度5μm。 6.2 流動相：乙腈+水+磷酸（體積分數為40+60+0.1）。 6.3 流速：0.8mL/min。 6.4 檢測波長：365nm。 6.5 柱溫：室溫。 6.6 進樣量：20μL。 7. 樣品測定 7.1 試樣制備 取魚、蝦、蟹、鱉等水產品可食部分，切成不大于5mm×5mm×5mm的小塊后混勻，經高速組織搗碎機搗碎即可，充分混勻。 7.2 提取 稱取搗碎樣品約10g（至0.01g），加25mL二氯甲烷攪拌分散后浸泡15min，在振蕩器上振蕩5min，提取液經無水硫酸鈉柱濾入蒸發燒瓶中，殘渣分別用25mL和15mL二氯甲烷按上述方法各重復提取一次，再用15mL二氯甲烷沖洗無水硫酸鈉柱，并采用洗耳球吹出柱中液體，濾液均濾入同一蒸發燒瓶中，濾液于旋轉蒸發儀上在45℃左右水浴下減壓蒸發去除溶劑，蒸發速度控制在每秒一滴。 7.3 凈化 用1.0mL流動相和1.0mL正己烷溶解殘渣并充分洗滌蒸發燒瓶，將液體移入離心管中，在4000r/min離心5min，用尖嘴吸管移去上層正己烷層，再向離心管中加入1.0mL正己烷，混勻2min，離心，用尖嘴吸管移去上層正己烷層，下層清液經0.45μm膜孔濾器過濾后進HPLC分析。 7.4 測定 7.4.1 呋喃唑酮標準工作液配制 臨用前，取呋喃唑酮標準儲備液，用流動相稀釋成濃度為0.01μg/mL~1.00μg/mL的標準工作液。 7.4.2 液相色譜測定 根據樣品液中呋喃唑酮殘留量情況，選定峰高相近的標準工作溶液。標準工作溶液和樣品液中呋喃唑酮響應值均應在儀器檢測線性范圍內。對標準工作溶液和樣品液等體積參插進樣進行測定。在上述色譜條件下，呋喃唑酮保留時間約為5.8min。 7.5 空白試驗 除不加試樣外，按7.2~7.4步驟進行。 8. 結果計算與表述 根據標準工作液和樣品液的峰高，按式（1）計算樣品中呋喃唑酮殘留量： （h-h0）×V×1000 C=Cs × ···································（1） hs×m 式中： C──樣品中呋喃唑酮殘留量，單位為微克每千克（μg/kg）； h──樣品液中呋喃唑酮的峰高； hs──標準工作溶液中呋喃唑酮的峰高； h0──空白試驗的峰高； Cs──標準工作溶液中呋喃唑酮的濃度，單位為微克每毫升（μg/mL）； V──樣品液zui終定容體積，單位為毫升（mL）； m──樣品的稱取量，單位為克（g）。 9. 線性范圍、檢測限、回收率 9.1 線性范圍 本方法的呋喃唑酮標準工作液線性范圍為0.01μg/mL ~1.00μg/mL。 9.2 檢測限 本方法的檢測限為1μg/kg。 9.3 回收率 本方法回收率為72.8%~96.2%。 |