生物制藥是生物技術產業(yè)中發(fā)展zui為迅速的部分，以單克隆抗體藥物為 標志，目前已批準35個抗體藥物上市，用于癌癥、自身免疫、黃斑變 性、血液病和感染治療等[1]。在生物制藥的每個生產環(huán)節(jié)，產品的純化和分 析過程都至關重要。早期抗體的質量控制過程中，必須測定樣品的效價、聚 集體和電荷亞型。單克隆藥物（MAb）產品中兩個主要的雜質是電荷亞型單 抗和單抗聚集體，這些副產物會產生與主產品不同的藥效，有時會引起嚴重 的副作用，如抗藥性抗體的形成。蛋白聚體是在生產過程、純化或者運輸過 程中產生（如溫度，pH的影響）。本文討論了采用一套HPLC系統(tǒng)（UltiMate 3000鈦系統(tǒng)）同時實現(xiàn)單克隆抗體的聚集體的分離和電荷亞型的分離。

測試條件 儀器：UltiMate 3000鈦系統(tǒng)，包括帶有在線脫氣 單元的雙三元梯度泵；帶有生物兼容的十通閥；WPS- 3000T（B）FC分析型，帶樣品收集功能的自動進樣器； 紫外檢測器（UV）；二極管陣列檢測器（DAD）。系統(tǒng) 連接見圖1。 離子交換色譜（IEC右泵） Thermo Scientific MAbPac SCX -10（4 mm i.d. ×250 mm ）色譜柱陽離子交換模式分離單克隆抗體的電 荷亞型

色譜條件： 流動相A：20 mM MES緩沖鹽，60 Mm NaCl ，pH5.6 流動相B：20 mM MES緩沖鹽，300 Mm NaCl ， pH5.5 梯度分離條件：30 min內15-45%B；6 min 100%B清 洗；10 min 15%B平衡 流速：1.0 mL/min 檢測波長：280 nm 溫度：30 ℃

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