新生兒的健康

都說“十月懷胎，一朝分娩”，母親是偉大的，每對父母都希望有一個健康的寶寶。但是隨著人類的發展和社會的進步，也帶來了環境的污染，加之工作壓力，生活不規律等眾多因素影響，以及家族伴染色體遺傳疾病等，使我們人類本該擁有的功能退化，比如不孕不育或是產生帶有先天性代謝缺陷疾病的嬰兒，新生兒的健康與否牽動著每個父母的心。

怎么辦？

因此，在新生兒群體中，用快速、敏感的實驗室方法對新生兒的遺傳代謝病、先天性內分泌異常以及某些危害嚴重的遺傳性疾病進行篩查，對那些患病的新生兒在臨床癥狀尚未表現之前或表現輕微時通過篩查，得以早期診斷、早期zhi療，防止機體組織器官發生不可逆的損傷。避免患兒發生智力低下、嚴重的疾病或死亡。

國外在早年間就已經對苯丙酮尿癥(phenylketonuria，PKU) 篩查進行了研究，并將串聯質譜技術（MS/MS）應用于新生兒篩查，我國于1994年10月頒布了《中華人民共和國母嬰保健法》，以法律形式確定了新生兒疾病篩查在疾病預防發面的地位，衛生部于2010年11月制訂了《新生兒疾病篩查技術規范（2010年版）》，對我國目前的兩個主要篩查病種PKU及先天性甲狀腺功能減低癥（congenital hypothyroidism，CH）的篩查進行了進一步的規范指導，其新生兒篩查工作已在全國范圍內得到普及。

賽默飛有辦法

賽默飛一直致力于為各行各業提供有力的檢測利器。針對新生兒篩查技術的不斷發展，賽默飛開發了利用三重四極桿氣質聯用產品TSQ9000快速檢測新生兒尿液中134種有機酸的分析方法，利用正構烷烴進行保留時間校正，操作方便快捷，靈敏度高，可為40種新生兒遺傳代謝疾病的診斷提供有力的依據。

01樣品制備

有機酸類一般不易氣化，因此需對其進行衍生化處理（BSTFA+1%TMCS）以增強其氣化程度。將已測定肌酐含量的尿液混合均勻，吸取相當于0.2mg肌酐的尿液，加到15mL離心管中，加入20μL脲酶（1 unit/μL），渦旋混合后置于37ºC恒溫30min，加入事先計算體積的內標溶液（MGA和C24：0.5mg/mL，TA：1.0mg/mL）和蒸餾水，使總液量達到2mL，渦旋混合，然后加入500μL5%鹽酸羥銨和400μL 2.5N氫氧化鈉溶液，混勻，室溫靜置60min氧化，加入350μL6N鹽酸溶液，混勻。（此時，樣品處理可以暫停，放入4℃冰箱冷藏）用乙酸乙酯萃取兩次，渦旋、離心，每次6mL，合并兩次萃取液至于離心管中，加入5g無水硫酸鈉，渦旋、離心，轉移萃取液至新離心管中，氮吹至1mL左右，轉移至1.5mL進樣瓶中，氮吹至干，加入100μL BSTFA+1%TMCS 80ºC衍生化30min，之后轉移至內插管中，進樣測定。

02檢測難點及注意事項

#難點一：化合物較多，標液難買且不易互溶

解決辦法：利用每種化合物的保留指數，通過正構烷烴的保留指數和保留時間計算出每種化合物的保留時間，無需購買標液，直接測定樣品。

#難點二：無需標液，排除假陽性

解決辦法：SIM/Full Scan同時采集數據

在檢測結果中如果出現較大色譜峰時，可通過全掃數據進行NIST譜庫檢索，以確定該化合物。

#難點三：無需標液，如何定量

解決辦法：利用半定量法進行定量

如下圖所示，在樣品中加入已知含量的內標十七烷酸（MGA）,利用目標化合物與內標（MGA）峰面積比例計算出樣品中有機酸的含量。建立了TraceFinder及變色龍兩種工作軟件方法，滿足不同用戶使用。

注意事項：由于衍生化試劑遇水分解失效，所以要盡量除去樣品中水分，吸取衍生化試劑時盡量減少其暴露在空氣中的時間。以保證重復性。

03實際樣品測定

利用上述方法進行實際樣品測定，上圖為患有癲癇性腦病的4個月嬰兒尿樣，下圖為正常2個月嬰兒尿樣。

總結

本方法靈活快捷，操作簡單，重現性好，能夠為新生兒遺傳代謝疾病的篩查與診斷提供初步的有力依據。

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