藥品雜質是反映藥品質量的重要指標，人用藥品注冊技術要求國際協調會議（Internat ional Conference of Harmonizition ICH）要求：表觀含量>0.1%的雜質應進行定性分析；常規的雜質定性分析方法通常采用分離制備雜質純品，再進行波譜學方法解析。

近年來，越來越多的利用液質聯用技術分析有關物質的含量及定性。但目前藥典中很多的有關物質分析的方法，均采用非揮發性緩沖鹽，甚至添加了離子對試劑作為流動相，因此不能直接進入質譜分析，給雜質定性帶來了很大的挑戰，導致應用出現局限性。本方法介紹了采用柱切換二維液相色譜分離-質譜定性的方法，來解決此類問題，對一維上洗脫下來的雜質等目標化合物經過閥切換至二維色譜柱，在二維色譜柱上進行除鹽后，再進質譜進行定性分析，通過質譜裂解規律，尋找雜質可能產生的來源以及形成的機理，取得了較好的效果。本實驗儀器連接圖見圖2-14

頭孢地尼，屬第3代頭孢，其結構見圖2-13。膠囊劑：50 mg/粒，100 mg/粒，由日本藤澤藥品工業公司原研，1991年日本上市，商品名Cefzon，1997年12月被美國上市，1999年在韓國上市，2001年國產頭孢地尼獲準在中國上市。該品用于對頭孢地尼敏感的葡萄球菌屬、鏈球菌屬、肺炎球菌、消化鏈球菌、丙酸桿菌、淋病奈瑟氏菌、卡他莫拉菌、大腸埃希菌、克雷伯菌屬、奇異變形桿菌、普魯威登斯菌屬、流感嗜血桿菌等菌株所引起的感染。

一維分析柱：Acclaim 120 C18，5 µm，4.6×150 mm，P/N：059148；二維色譜柱：Acclaim PAII，3 µm，3.0×50 mm， P/N：068973MS工作參數：1） Full Scan，ESI源，正離子模式，M/Z: 100-600；負離子模式：100-600；Scan time 0.4S。2） 子離子掃描（母離子根據full scan掃描得到）：正負離子同時掃描，Full scan M/Z=100-600，Scan time 0.2s，FWHM 0.70，CE 10V，Energy Ramp: 40eV3）調諧參數：電壓：2200 V；霧化溫度：350℃；鞘氣壓力：35 psi；輔助氣壓力：10 psi；毛細管溫度：300℃。

一維分析流動相（右泵），梯度程序見表2-9：流動相A：0.25%四甲基氫氧化銨溶液（用磷酸調節pH=5.5）1000 mL，加入0.l mol/L乙二胺四醋酸二鈉溶液0.4 mL；流動相B：0.25%四甲基氫氧化銨溶液（用磷酸調節pH=5.5）-乙睛-甲醇=500-300-200，加入0.1 mo1/L乙二胺四醋酸二鈉溶液0.4 mL。二維分析流動相（左泵），梯度程序見表2-10：A：0.005 mol/L醋酸銨，pH用乙酸調節至5.5；B：乙腈。閥切換時間見表2-11，測定譜圖見圖2-15、2-16。柱溫：40℃；進樣體積：20.0 µL；檢測波長：254 nm。

根據破壞樣品紫外譜圖，發現熱破壞雜質峰更多，因此，選用熱破壞樣品進行雜質分析。從圖可以看出，9號峰為主峰頭孢地尼，其他峰為雜質峰，分別對6、7、9、10、12、15號峰等進行了閥切換，把每個峰先切到定量環里，然后再啟動左泵洗脫除鹽后，進質譜分析。圖2-16為質譜上進樣閥除鹽切換時間試驗圖譜。從圖2-16可以看出，上圖為負離子模式，M-H為291.1，是EDTA鹽；正離子模式下，M+H 74.1為四甲基氫氧化銨鹽，因此，要把流動相中的鹽去除干凈，需要找到合適的質譜上的進樣閥的切換時間，把這兩個峰進行切除，流入廢液。在本試驗中，質譜進樣閥的切入時間約為4.0 min（以六通閥切換進樣后開始計算）。通過該方法，對每一個雜質進行單獨切換后，通過定量環轉移至二維色譜柱上，再采用與質譜兼容的流動相，把二維色譜柱上保留的鹽份去除掉，然后把目標化合物洗脫下來，進質譜分析，該方法取得了較好的結果，解決了相關難題，最終分析結果見下表