動態光散射（DLS）一般不建議在純去離子水中進行粒徑測量，因為顆粒周圍的雙電層會發生長程相互作用，測得的水合粒徑通常偏大2 ~ 10nm。可通過在純水中加入少量的鹽來屏蔽顆粒上的電荷，帶相反電荷的離子將壓縮在顆粒周圍，屏蔽長程靜電相互作用。由于氯離子通過于活躍，可能會與顆粒發生反應或吸附在其表面，推薦使用10 mM KNO₃溶液作為水相樣品稀釋液。

如果液體是非極性純溶劑（如甲苯），建議選擇色譜級溶劑。非極性溶劑通常不會溶解或攜帶灰塵，可不過濾直接使用。如果溶劑是極性的，可通過過濾去除溶劑中的灰塵。尤其是含鹽的水相稀釋液（鹽類通常含有很多雜質），如KNO₃溶液，建議使用0.1或0.2微米的過濾器進行過濾，過濾前先對過濾器進行沖洗。

如果樣品是干粉狀，在測量前需要將其溶解或懸浮。若樣品是蛋白質，溶液不可劇烈攪拌且絕不能進行超聲處理。如果樣品較為堅固，則可使用超聲、渦旋、旋轉等方法來溶解/懸浮樣品。用戶可通過嘗試不同的溶解方法和時間來確定溶解條件。在準備樣品時，仔細觀察樣品的分散情況。

對于液體樣品，可能需要對樣品進行稀釋。建議用樣品最初制備時所用的相同液體進行稀釋，并使用相同濃度的添加劑（如鹽、表面活性劑、分散劑等）。高濃度液體樣品可能呈不透明或乳白色，通常將一滴樣品加入到20毫升的液體中或進行1:1000的稀釋。

動態光散射（DLS）測量溶液的理想狀態應是澄清透明的。斯托克斯-愛因斯坦方程適用于無限稀溶液，如果樣品濃度過高，由于多重散射或粘度效應，測量的顆粒大小將有些許誤差。當顆粒濃度足夠高時，單個顆粒的散射光在懸浮液中被其他顆粒重新散射，就會發生多重散射，這將導致測量的粒度值被人為降低。當加入到液體中的樣品體積足夠大以至于改變液體的粘度時，就會發生粘度效應。如果由于粘度效應導致參與計算的液體粘度錯誤，那么測得的粒度值也將不準確。下圖展示了在高濃度下測量的影響。

根據樣品和液體的不同，當濃度過高不適合DLS測量時，可以看到粒度值的減小或增大。在濃度非常高的情況下，這種現象通常會逆轉。

有兩種方法可以檢查濃度是否適合DLS測量：

對于配備雪崩光電二極管（APD）的儀器，在光強最大條件下稀溶液的散射光強度應小于2 Mcps。請注意，測量時應通過光強衰減器將光強調整為小于500-600 kcps。

驗證濃度是否適合DLS測量的第二種方法是在第一次測量后將樣品稀釋50%，如果稀釋后的粒徑值與稀釋前相同，且光強約為稀釋前的一半，則第一次測量的濃度及以下所有濃度都是合適的。

對于有顏色的樣品，只要激光沒有被溶液全部吸收，就可以對樣品進行測量。有色樣品和熒光樣品通常更難測量，可嘗試對樣品進行稀釋和添加熒光過濾裝置。

在過濾溶液時如果樣品顆粒被濾除會造成粒徑分布的改變，推薦使用比要測量的最大尺寸大2-3倍孔徑的過濾器對溶液進行過濾，過濾前先對過濾器進行沖洗。