熒光法是一種相對技術(shù)——也就是說，在進(jìn)行定量測定時，需要對濃度已知的材料進(jìn)行比較來測定。參比標(biāo)準(zhǔn)物可以是一個，也可以是一組。使用一組參比標(biāo)準(zhǔn)物的好處在于能夠驗證分析實驗是否在線性范圍內(nèi)完成，以及是否存在內(nèi)濾光效應(yīng)（熒光被樣品自身吸收）。觀察到的熒光強(qiáng)度（通常用 RFU——相對熒光單位表示）也與儀器的狹縫寬度、檢波器增益（電壓）、光源功率等的設(shè)置有關(guān)。不同的儀器（即使由同一個生產(chǎn)商生產(chǎn)，且使用看上去*相同的光學(xué)系統(tǒng)）會給出不同的結(jié)果，并且各個生產(chǎn)商采用的縱坐標(biāo)尺度不同，因此，RFU 值上存在差異并不能用于儀器的質(zhì)量的評判。
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