簡介美國衛(wèi)生與公眾服務(wù)部（DHHS）與精神衛(wèi)生管理局（SAMHSA）規(guī)定尿液的測試程序。強制性的準則要求一個實驗室在報道一個尿樣為陽性前必須進行對樣品進行初測和復(fù)測兩次分析測試。初測是對五種化合物進行免疫塞查（分別是：安非他命，苯環(huán)己哌啶）。免疫塞查包括了放射免疫檢定法（RIA），酶免疫分析法以及其他相關(guān)方法。免疫篩查成陽性的樣品在定兒子檢測中將進行色譜分離和質(zhì)譜鑒定。SAMHSA 規(guī)定 PCP 的限值為 25ng/ml

尿液檢測的一般流程分為如下七個步驟：1. 在尿樣中加入氘代的內(nèi)標化合物；2. 調(diào)節(jié)尿液的 pH 值；3. 水解尿液；4. 通過固相微萃取小柱（SFE）提取目標化合物，蒸干；5. 衍生化提取液（除了 PCP），蒸干；6. 用有機溶劑溶解提取物；7. 取 1-3μl 注入氣質(zhì)聯(lián)用儀，用三個離子對目標化合物進行定性及定量檢測。

玻璃器皿所有的玻璃器皿，包括自動進樣器的進樣小瓶和小體積內(nèi)置瓶都必須經(jīng)過硅烷化處理，以防止樣品吸附。所有的玻璃器皿用 10% 的二甲基二氯硅烷甲苯溶液浸泡 10min，再先后用甲醇和正己烷沖洗，最后吹干備用。試劑試樣乙酸，100 mM=2.86ml 冰醋酸溶解于 500ml 去離子水中。磷酸鹽緩沖液，100 mM pH6=1.7gNa2HPO4+12.14gNaH2PO4（調(diào)低 pH 值）。二 氯 甲 烷 / 異 丙 醇 / 氫 氧 化 銨（78:20:2） 萃 取 液=40ml 異丙醇 +4ml 氫氧化銨 +156ml 二氯甲烷，臨用現(xiàn)配。標準品和氘代內(nèi)標物由 Cerillant®(Round Rock, TX)提供。內(nèi)標物為：d5-PCP

儀器氣相色譜儀：PerkinElmer®Clarus®680 GC。進樣口：毛細管進樣口，壓力脈沖不分流進樣，進樣口溫度：250℃。進樣口襯管：Siltek ™帶玻璃毛（貨號為 N6502010）。氦氣柱流速：2ml/min。柱溫：100℃保持 0.5min 然后以 20℃ /min 升到 310℃，保持 4min。

壓力脈沖不分流進樣這個過程是在進樣的過程中提高進樣壓力，以將更多的樣品在短時間內(nèi)推入到色譜柱中，然后降低壓力以維持正常色譜分離流量。這個過時是通過以下時間事件來完成的：CAR2 5 mL/min -0.71 min ( 進樣前升高壓力 ).SPL2 0 -0.70 min ( 關(guān)閉進樣口做不分流進樣 ).CAR2 2 mL/min 0.7 min ( 進樣后恢復(fù)正常流量 ).SPL2 50 0.8 min ( 進樣后打開分流口 ).質(zhì)譜儀 PerkinElmer Clarus SQ 8 GC/MS, 具有 255L/S分子渦輪泵，EI 源。所有數(shù)據(jù)采用選擇離子模式（SIM），每個離子掃描時間為 20-30ms。選擇一個主要離子進行定性定量檢測。量選擇兩個附加離子輔助進行定性檢測。與標準庫相比，三個檢測離子色譜圖中頂點保留時間數(shù)不得超過 ±2scans。離子豐度比誤差不得超過20%。氘代內(nèi)標物可以用兩個離子，分別為一個定量主離子和頤個定性離子。SIM 離子：PCP：200,242,186d5-PCP：205,248RT: 5.17min

固相萃取目標化合物是通過固相萃取（SPE）從尿液中提取得到的。化合物在尿液通過固相柱時被吸附保留在固定相上，然后沖洗固定相以洗脫鹽分和其他雜質(zhì)。最后用更強洗脫能力的溶液洗脫下目標化合物。固相萃取柱為：C18-S 200mg/3ml 50u（CAT.NO.N9306462）。

試驗萃 取：1-2ml 尿 液 +ISTD+2ml 100 mM 磷 酸 鹽 緩 沖 液（pH6）。SPE 柱提取：用 3ml 甲醇沖洗小柱，然后用 3ml 去離子水，最后用 1ml 磷酸鹽緩沖液（pH6）。提取樣品：用 3ml 去離子水沖洗小柱，然后用 1ml 1Mm乙酸溶液沖洗，最后用 1ml 甲醇。洗脫：用二氯甲烷 / 異丙醇 / 氫氧化銨（78:20:2）萃取液洗脫，并用錐形瓶收集洗脫液。在 50 ℃ 以 下 蒸 干， 檢 測 PCP 不 需 要 進 行 衍 生。 用100μL 乙酸乙酯溶解后轉(zhuǎn)移到小體積進樣平內(nèi)襯管中，進樣 1μL。

線性范圍10% 限度（2.5ng/ml），40% 限度（10ng/ml），100% 限度（25ng/ml），125% 限度（31.25ng/ml），500% 限度（125ng/ml），1000% 限度（250ng/ml）。

結(jié)論本應(yīng)用采用 GC/MS 對尿液中 PCP 進行分析，測得定量限為 2.5ng/ml，檢測限為小于 1.0ng/ml。實驗室可以采用相同的方法對樣品進行非標準檢測。快速樣品檢測可以通過采用更短的氣相色譜柱，更快的流速，更短的冷卻時間和自動進樣器提前預(yù)洗滌控制來實現(xiàn)。珀金埃爾默公司的 Clarus SQ 8 GC/MS 系統(tǒng)在選擇離子模式中提供了高靈敏度的可靠的結(jié)果。Turbomass GC/MS 軟件按要求可以提供三個離子的檢測數(shù)據(jù)的檢測報告模板，簡單易懂。圖二是一個樣品定制的三離子比報告。