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            模型動物小課堂:常用的動物模型SOP(二)

            來源:遼寧長生生物技術股份有限公司   2021年12月06日 09:22  
             7.大腦中動脈栓塞和缺血再灌注(線栓法)
            大鼠大腦中動脈栓塞和缺血再灌注[19](供參考)
            SD大鼠,雄性,250g-300g,暴露左頸總動脈(CCA)、頸外動脈(ECA)和頸內動脈(ICA),從ECA插入3-0尼龍單絲縫線由ICA直至大腦中動脈 (MCA)。 MCA 閉塞 1.5 小時后,通過去除細絲來模擬再灌注。 在手術過程中,所有大鼠的體溫均保持在37.0°C。
            模型鑒定
            Longa五分法對鼠神經功能進行評分

            小鼠大腦中動脈栓塞和缺血再灌注[20](供參考)
            C57BL/6,8周,用1.5%異氟烷麻醉小鼠。在顯微鏡下,通過中線頸部切口暴露左側頸總動脈和頸外動脈。將涂有硅橡膠(Doccol)的6–0尼龍單絲通過頸外動脈殘端引入左側頸內動脈,以閉塞大腦中動脈的起點并阻斷流向紋狀體和皮層的血流。閉塞60分鐘后,通過抽絲引入再灌注,并縫合切口。在整個過程中,體溫保持在37±0.5℃。
            8.膠原誘導風濕類關節炎模型
            大鼠膠原誘導風濕類關節炎模[21](供參考)
            SD大鼠,200g-250g,用等體積的不*弗氏佐劑IFA乳化牛ⅱ型膠原(CII)。然后將含CII的乳劑(0.2毫升)皮內注射入大鼠的尾根以誘導炎癥(初次免疫)。在初次免疫后的第7天,將相同體積的該乳劑皮內注射到大鼠的左后肢中,以增強初次免疫(第二次免疫)。

            模型鑒定
            沒有關節腫脹跡象的動物被移除。后肢關節腫脹度評分如下:0,無紅腫;1、輕度紅腫;2、中度紅腫并伴有關節活動度的微小變化;3、嚴重紅腫,伴有關節僵硬和活動明顯受限。
            小鼠膠原誘導風濕類關節炎模型[22](供參考)
            昆明小鼠,22-26g,用等體積的*或不*弗氏佐劑乳化 0.01 M 乙酸中的豬 II 型膠原溶液(2 mg/ml)。 第0天,昆明小鼠在尾根部皮下注射100μl*弗氏佐劑中的II型膠原蛋白。第一次免疫后第21天,小鼠腹腔注射100μlII型膠原蛋白 不*弗氏佐劑。之后再過7天成模。
            9.妊娠糖尿病
            大鼠妊娠糖尿病[23](供參考)
             Wistar 大鼠,體重為 180-220 克(12 周齡),在適應飲食和環境 2 周后,將雌性 Wistar 大鼠與經過驗證的繁殖雄性放置過夜進行繁殖。 第二天早上進行陰道涂片檢查是否存在jing子。 一旦觀察到jing子,那一天被定為妊娠第 0 天 (GD0)。 在妊娠第 1 天,孕婦隨機分為對照組和糖尿病組。 糖尿病組 6 只雌性大鼠接受 40 毫克/千克/體重的鏈脲佐菌素(STZ)(Sigma,St Louis,MO,USA)溶解在無菌鹽水溶液(0.85%)中,對照組(6 只大鼠)接受等量的 體積生理鹽水腹腔注射 (IP)。
            模型鑒定
            注射72小時后,血糖水平為 120-250 mg/dl 的母鼠被認為是妊娠糖尿病 (GDM)。
            10.哮喘模型
            大鼠哮喘模型[24](供參考)
            SD大鼠,6周左右,180g-200g,實驗第一天,每只大鼠腹腔注射1 mL 10% OVA溶液,含100 mg氫氧化鋁干粉。致敏兩周后,這些大鼠通過霧化給藥1%OVA溶液(溶解在生理鹽水中)誘發哮喘,連續三天開始,然后隔天刺激一次,持續20分鐘。
            模型鑒定
            如果大鼠出現呼吸加速、打噴嚏、口周發紺、腹部痙攣和點頭式呼吸,則表明成功刺激了大鼠的哮喘。
            小鼠哮喘模型[25](供參考)
            BALB/c小鼠,在第 1 天和第 8 天,通過腹膜內注射 500 μL 鹽水中的 20 μg OVA(Sigma Chemical Co.)和 1 mg 氫氧化鋁(Sigma Chemical Co.)使小鼠致敏。在第 21 天,使用霧化器(3 mL/min,NE-U17,OMRON Co. Ltd.,Kyoto,Japan)用 5% OVA 每天對小鼠進行一次攻擊,持續 5 天,持續 30 分鐘。

            參考文獻

            [19]Lixisenatide Reduced Damage in Hippocampus CA1 Neurons in a Rat Model of Cerebral Ischemia-Reperfusion Possibly Via the ERK/P38 Signaling Pathway
            [20]Neuroprotective effect of p-coumaric acid in mice with cerebral ischemia reperfusion injuries
            [21]urcumin attenuates collagen-induced rat arthritis via anti-inflammatory and apoptotic effects
            [22] Flaccidoside II ameliorates collagen-induced arthritis in mice
            [23]Gestational diabetes influences retinal Muller cells in rat’s offspring
            [24]Soufeng Yuchuan decoction mitigates the ovalbumin-induced lung damage in a rat model of asthma
            [25]1-Acetoxychavicol Acetate Isolated from Alpinia galanga Ameliorates Ovalbumin-Induced Asthma in Mice
            [26]鄺滿元, 劉映霞, 李映菊. 肝纖維化動物模型造模方法的研究進展[J]. 現代生物醫學進展, 2008, 08(009):1768-1770.
            [27] Liu Y ,  Gu X . Establishment and evaluation of cholestatic liver fibrosis model induced by bile duct ligation in SD rat[J]. Chongqing Medicine, 2012.
            [28]Xiao Y Y . Establishment and evaluation of liver fibrosis model induced by bile duct ligation in mouse[J]. Journal of Chongqing Medical University, 2008.
            [29] KALU DN .The ovariectomized rat model of postmenopausal bone loss [ J ] .Bone and Mineral, 1991, 15 :175 -192 .

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