按照不同的方式進(jìn)行分類與選擇合適的酶標(biāo)板是行之有效的

酶標(biāo)板，是一種配合在酶標(biāo)儀上，用來做酶聯(lián)免疫實(shí)驗(yàn)的器材。雖然它看上去只是一塊普通的有孔的塑料板，但是在酶聯(lián)免疫實(shí)驗(yàn)中，酶標(biāo)板是一個(gè)不可少的中介，沒有了這個(gè)中介，整個(gè)實(shí)驗(yàn)就無法進(jìn)行操作。換一句話說，只要你用酶標(biāo)儀做酶聯(lián)免疫實(shí)驗(yàn)，就必然會(huì)用到酶標(biāo)板。

酶標(biāo)板種類繁多，可以按照不同的方式進(jìn)行分類與選擇：

一：根據(jù)酶標(biāo)板底部的不同，可以分為:

1、平底：平底的折射率低，適于在酶標(biāo)儀檢測(cè)。
2、U型底：U型底的酶標(biāo)板折射率較高，方便加樣、吸樣、混勻等操作，可以不用放在酶標(biāo)儀上，直接通過目測(cè)觀察顏色變化情況，從而判定有無相應(yīng)的免疫反應(yīng).
3、V型底:V底的酶標(biāo)板可以精確的吸取樣品。

 

二：根據(jù)酶標(biāo)板與蛋白和其它分子結(jié)合能力的不同，分為：

1、高結(jié)合力：表面經(jīng)處理后，其蛋白結(jié)合能力大大增強(qiáng)，可達(dá)300~400ngIgG/cm2，主要結(jié)合的蛋白分子量>10kD。使用該類酶標(biāo)板可提高敏感性，并可相對(duì)減少包被蛋白的濃度和用量，不足之處為較易產(chǎn)生非特異性反應(yīng)。抗原或抗體包被后，以非離子去污劑無法有效地封閉未結(jié)合蛋白的部位，需使用蛋白作為封閉劑。

2、中結(jié)合力：經(jīng)表面疏水鍵被動(dòng)與蛋白結(jié)合，適合作為分子量>20kD的大分子蛋白的固相載體，其蛋白結(jié)合能力為200~300ng IgG/cm2。由于該類酶標(biāo)板所具有的僅與大分子結(jié)合的特性，適用于作為未純化抗體或抗原的固相載體，可降低潛在的非特異性交叉反應(yīng)。該類板可以惰性蛋白或非離子去污劑作為封閉液。

3、氨基化：經(jīng)表面改性處理后擁有帶正電荷的氨基，其疏水鍵由親水鍵取代。該類酶標(biāo)板適合作為小分子蛋白的固相載體。使用合適的緩沖液和pH值，其表面可通過離子鍵與帶負(fù)電荷的小分子結(jié)合。由于其表面的親水特性和可通過其它交聯(lián)劑共價(jià)結(jié)合的能力，可用于固定溶于Triton-100、Tween 20等去污劑的蛋白分子。該類板的缺陷為由于降低了疏水性，一部分蛋白分子無法結(jié)合;此外，其表面需有效地封閉。由于親水和共價(jià)的表面特性，使用的封閉液必須能夠與非反應(yīng)性氨基基團(tuán)和所選擇的交聯(lián)劑中任何功能基團(tuán)發(fā)生作用。

 

三：根據(jù)顏色分為：

1、透明：透明的是比較常用的，用于一般的酶聯(lián)免疫實(shí)驗(yàn)。不能用透明的酶標(biāo)板來進(jìn)行化學(xué)發(fā)光實(shí)驗(yàn)。
2、不透明：相對(duì)于透明的的板子，還有用于發(fā)光檢測(cè)用的不透明的板子，一般有黑色和白色兩種。黑色的酶標(biāo)板自身會(huì)有光吸收，所以它的信號(hào)相對(duì)于白色的板子要低很多，因此一般用于檢測(cè)較強(qiáng)的光，如熒光檢測(cè)。而白色的酶標(biāo)板就用于較弱的光檢測(cè)，常用于一般的化學(xué)發(fā)光。另外黑色的酶標(biāo)板還可以消弱非特異反應(yīng)帶來的問題。