FT-IR顯微紅外光譜法檢測液體藥物中的顆粒和雜質

光學顯微鏡具有較高的空間分辨率，可以觀察和識別顆粒物。但是，光學顯微鏡無法解析化學成分。相比之下，FTIR顯微紅外不僅具有高的空間分辨率，而且可以鑒定顆粒----提供全面的化學信息。所以，FTIR是適合顆粒物表征的工具。

下面，以液體藥物為例，用FTIR顯微紅外光譜儀，采取全自動微粒測試法和焦平面陣列探測器法（FPA）分析顆粒物。并探討哪種方法更高效。

LUMOS II FTIR顯微紅外光譜儀

對含有污染顆粒的抗體溶液分析。首先，顆粒物必須使用過濾裝置從液相中分離出來。然后，使用LUMOS II FTIR顯微紅外光譜儀，用高分辨率可視照相機自動獲取濾膜的整體圖像。

根據可見光圖像對比度，使用布魯克顆粒查找功能（Bruker Particle Finder）檢測顆粒物。結果顯示，溶液中存在十個顆粒物。自動識別每種顆粒物的測量點。然后，對檢測到的顆粒物進行編號、放大并疊加到可見光圖像上（圖1）。

圖1：濾膜上顆粒物的可見光圖像

透射方式且采用軟件中OPUS Cluster ID可全自動化測試用采集每個顆粒的紅外光譜圖。進而鑒定出每一種顆粒的化學成分（表1）。

表1：通過搜索數據庫確定檢測到顆粒的成分

同樣的抗體溶液用FPA成像法測試。此方法未采用傳統的FTIR微光譜法，而是利用LUMOS II的FPA面陣列探測器，在測試過程中能夠以最快的速度完成紅外成像，不到一分鐘便完成整個測試區域，空間分辨率可達到5微米/像素。

運用布魯克的化學成像人工智能算法可以自主地進行數據處理，鑒別出多個顆粒（圖2）。光學顯微鏡下可見的纖維鑒定為纖維素（粉紅色），另外兩個可見顆粒鑒定為聚苯乙烯顆粒（藍綠色）。

圖2：濾膜和顆粒物的可見光圖像（左）；FTIR化學成像圖（右）

與傳統的FTIR顯微光譜法相比，FPA成像法可以得到更多的信息。如圖2所示，FPA成像法精準檢測并鑒定出可見光照片未拍出來的硅油（紅色）和蛋白質團簇（綠色）。顆粒檢測和鑒定均基于采集到的顆粒的FTIR特征。所以不存在未檢測到的顆粒。