為什么熒光顯微鏡能觀察到熒光，用LUYOR-3415RG觀測看不到？

1.為什么熒光顯微鏡能觀察到熒光，用LUYOR-3415RG觀測看不到？

因為有些植入的熒光蛋白不是整體表達，只是局部表達，表達的面積太小，人的肉眼無法識別，而熒光顯微鏡是在放大幾十倍甚至上百倍觀察的效果。

2.為什么按照LUYOR-3415說明書操作卻看不到熒光的表達

 原因是GFP激發光源沒有選擇正確，比如載體標注的熒光蛋白應該在488nm下激發出熒光，但是卻選擇了540nm或者365nm的激發光源去激發熒光蛋白，這種情況是看不到熒光蛋白的。可以根據LUYOR-3415 GFP激發光源介紹或者聯系客服小姐姐進行咨詢再選擇。

 3.為什么波段選擇是正確的還看不到熒光表達？

除了表達量少以外，很有可能是實驗的操作失誤，導致實驗失敗，因此看不到熒光，可以選擇其他的陽性質粒進行檢測儀器效果。

4.為什么說載體表達量低會導致看不到熒光蛋白？是不是表達量低的熒光蛋白都會看不見熒光？

大家都知道肉眼的可視范圍是有限的，比如只能看見籃球大小的物體，這時我們的載體表達量只有乒乓球大小就會導致看不見。并不是的表達量低都看不見熒光表達，只有低于人眼可視范圍的表達量才會導致看不見熒光的表達。這時可以借助普通的顯微鏡加上LUYOR-3415組合成熒光顯微鏡進行觀察。

5.LUYOR-3415RG如何切換光源？

切換光源可在儀器頭部后方圓形按鈕處，輕輕按下按鈕即可輕松切換光源

 6.植入到葉片的熒光蛋白為什么無法觀察到？

因剛剛植入進去不久，表達位置太小，肉眼無法識別。特別是在組培繁殖研究經常遇到此問題。

7.用LUYOR-3415熒光蛋白觀測鏡無法分選含有GFP的種子

因為一般種子表皮都有堅硬的外殼，很多種子外殼上沒有表達GFP，隔著外殼很難去分選種子。

8.為什么老鼠早期可以看到熒光蛋白后期就很難看得到？

剛出生的轉基因老鼠皮膚比較薄，毛發少，很容易觀察到GFP,在生長一段時間在表皮就很難看得到。 

 9.觀察到的GFP效果如何拍照？

如果用單反相機拍照，請購買專用的拍照濾鏡，把相機調試到合適的拍照模式（不同品牌的相機拍照模式不一樣），我公司提供62mm的單反相機專用拍照濾鏡，可以單獨購買。

 10.購買的62mm相機濾鏡和照相機不配套怎么辦？

請先識別自己相機鏡頭尺寸，正視相機前端，上面一般會標識XXmm，例如：58mm，67mm等，如果是58mm的鏡頭，請購買62轉58mm的轉換卡，通過轉換卡可以將62mm的濾鏡安裝到58mm鏡頭上。我公司提供部分常規尺寸的轉換卡，常規的轉換卡也可以向我公司技術人員免費索取。 

11. 路陽的熒光蛋白激發光源有什么優點？

Luyor-3415采用了雙通道構造，一臺即可實現多種熒光蛋白的觀察，比如：GFP,RFP,YFP,CFP等，且光源照射面積廣激發面積大，2x6顆大燈柱，激發出的熒光明亮，容易觀察且清晰。

12.用于種子熒光蛋白篩選，用哪一個型號比較好？

如果長時間用于種子篩選，建議購買LUYOR-3415RG，這款可以用交流適配器供電也可用鋰電池供電，可選配支架進行長時間工作。 

13.路陽的熒光蛋白觀測鏡都有哪些用戶？

中國農業大學、中山大學、南京農業大學、華中農業大學，中國農科院、中科院遺傳所等，目前有100多家科研單位在使用。

14.LUYOR產品可以試用嗎？

luyor熒光蛋白觀測鏡可以試用，試用產品為友情提供，為了讓更多需要篩選的實驗室研究人員了解到它，得到使用，希望大家多多愛護。

15.為什么別的廠家的熒光蛋白觀察眼鏡和luyor的激發光源不匹配？

我們的觀察眼鏡和激發光源是經過我們工程師調配好的，不僅能夠阻隔掉激發光，同時又能保證發射的熒光能夠更多的觀察到。

16.觀察眼鏡可以多買嗎？

因我們一種光源標配是一副眼鏡，需要多配觀察眼鏡的請直接聯系我們銷售和當地代理商購買。

17.如果需要長時間使用激發光源進行實驗的操作，是不是需要一直用手舉著儀器？還是有什么解決方法？

可以選取3415專用支架，支架為可調支架，如果長時間用燈的話，可調支架可以解放雙手。

18.產品保修多久？
我們主機是免費保修3年，充電電池組免費保修1年。
若有其他問題需要咨詢，可掃描下方二維碼聯系上海路陽儀器有限公司客服咨詢。

多種應用

由于GFP及其易用性，GFP等熒光蛋白已成為分子生物學的主流。科學家可以很容易地利用含有GFP的質粒作為一種手段，達到許多功能目的，以下是一些常用的用途，但是目前還有許多其他的用途，并且新的GFP技術正在不斷發展！

融合標記：GFP是最常見的用途之一，它可以與蛋白質的N-或C-末端融合，這使科學家能夠可視化基因表達的時間和地點。

轉錄報告員：將GFP置于感興趣的啟動子的控制下，可以用來有效地監測特定細胞類型中啟動子的基因表達。這種轉錄報告是GFP最早的應用之一。

F?rster共振能量轉移（FRET）：這是用來研究兩個蛋白質之間的相互作用，或在兩個蛋白質域之間發生構象變化的相互作用。典型地，使用了兩種具有重疊激發/發射光譜的熒光蛋白；融合到每個正在測試的蛋白質或域的一個。在這里找到微動質粒。

分裂EGFP：作為一種替代fet的方法，拆分EGFP也被用來研究蛋白質與蛋白質的相互作用。在這種情況下，EGFP的兩部分融合到感興趣的蛋白質中，當它們接近時，EGFP的兩部分經歷折疊、成熟和熒光。

生物傳感器：采用FRET、鈣調蛋白等多種策略，設計了一系列基于GFP的熒光生物傳感器，用于檢測各種細胞內條件，包括離子（如Ca2+）濃度和pH等。

光遺傳學：科學家可以利用光來檢測、測量和控制分子信號、細胞和細胞群，以了解它們的活動，并可視化改變對這種活動的影響。了解更多關于光遺傳學的開放式光遺傳學，并在Addgene找到光致執行器和傳感器。

細胞標記/選擇：表達結構如質粒通常包括GFP作為標記，以幫助識別哪些細胞成功地獲得了質粒。這可以作為選擇抗生素的替代品。這種類型的質粒可能在感興趣基因的附加啟動子的控制下，或與感興趣基因相同的轉錄子表達GFP，但在內部核糖體進入位點（IRES）之后。