微流控毛細管電泳答疑小課堂

Revvity的明星產品LabChip GXII Touch 毛細管電泳系統采用一個單吸管微流體芯片，可快速對96或384孔板中的蛋白質樣品進行指征分析。微流體芯片技術可全自動的完成蛋白質樣品的染色、脫色、電泳分離和分析。Labchip儀器的光學元件檢測到激光誘導的熒光信號后，易于操作的系統軟件自動分析數據，并通過Ladder和內標校正為用戶提供蛋白質相對濃度、分子大小和純度等。可立即生成虛擬膠圖、電泳峰圖或匯總表格式的電子數據結果以供用戶查閱或報告（如圖1）。

圖1. LabChip GXII Touch 軟件的圖形化用戶界面

常見問題

Q

Low marker的作用是什么？

A

用于校正、對齊。比如跑400個樣品，出峰時間會有差異，必須用Low marker校正。

Q

為什么有的樣品比Ladder跑得慢？

A

因為試劑中的Ladder是沒有經過任何糖基化等修飾的，若樣品是經過修飾的，分子量就偏大，會跑得稍慢，基于原理，這一點在任何CE技術中都一樣，無法避免。

Q

蛋白芯片與核酸芯片有什么不同？

A

蛋白芯片有脫色步驟，因為蛋白變性后，樣品中有大量的SDS，需要去掉沒有與蛋白結合的SDS，否則背景值會很高。另外蛋白芯片不需要wash，而核酸芯片需要wash，因為蛋白芯片使用較快，能檢測的樣本只有400/200，經過測試發現不wash，對性能沒有影響。（此處Wash指實驗結束后芯片加Storage Buffer后放在設備上wash。）

Q

機器Purge的功能有什么作用？

A

Purge是施加3 min的正壓來疏通管路，防止冷凝水等堵塞管路。

Q

機器是否需要每天關機？

A

若做不到每天關機，至少需要2-3天重啟一下機器。

Q

上一個樣品run完到下一個樣品會有一個wash的過程，這一步是否能夠wash干凈？

A

可以一針樣品一針水去測試，實際測試結果是上一個樣品不會對下一個樣品產生干擾。