“唯快不破” SCIEX 7500+系統實現高覆蓋靶向脂質組學分析

在2024年美國質譜會（ASMS）會議上，生命科學分析技術領域的創新者SCIEX推出了SCIEX 7500+系統，這是SCIEX定量產品組合中的新款質譜儀，延續了定量可靠靈敏的傳統。該系統為科學家提供了靈敏度與耐用性的雙重保障。新的應用文章表明7500+系統因為超快的采集速度和靈敏度，能夠顯著提高高覆蓋靶向脂質組學分析的定量準確度、穩定性和對于脂質同分異構體的色譜分辨率1。

展示了SCIEX 7500+系統下進行約2000MRM離子對的高覆蓋脂質掃描的功能和能力。

脂質分析是一個具有挑戰性的分析過程。首先脂質數量眾多，約有大于>150,000個脂質；其次生物體內不同脂質含量差異大，含量跨度可達10-12個數量級；脂質結構復雜多樣，且目前標準品不全。質譜法由于其靈敏度高、特異性強、定量范圍寬等技術優勢，是目前用于脂質分析的主流技術。

SCIEX新推出的7500+三重四極桿質譜，提高了離子傳輸效率，實現采集速度的大幅度提升；同時兼具高靈敏度、快速極性切換和定量線性范圍寬等優勢。在此技術上，開發了可以定性和定量約2000種脂質分子的高覆蓋靶向脂質組學分析方法。方法使用HILIC色譜進行分離，可有效減小脂質共流出，避免共流出組分的相互影響。掃描速度的提升不僅可以帶來更多的掃描點數從而提升定量的準確度和穩定性，并且得到更好的峰形狀，提高了脂質異構體分辨率。

色譜使用Phenomenex Luna™ NH2 (100 x 2.1 mm, 2.6 µm)色譜柱. 流動相A為二氯甲烷和乙腈（7/93, v/v），流動相B為二氯甲烷和乙腈（50/50, v/v，含2mM乙酸銨）。

質譜基于多反應監測(MRM)掃描模式高覆蓋靶向脂質組學分析方法，使用 scheduled MRM (sMRM) 模式正負離子同時掃描，檢測1925種脂質，其中正離子模式下822種，負離子模式下1103種。

不同脂質峰面積的定量的CV統計也表示采集度對于高覆蓋靶向組學分析的重要性。上圖顯示了5種不同脂類的示例分析物峰，計算了5次連續進樣峰面積CV值。在不同掃描速度下，以3ms掃描速度分析的各分析物的CV值低。在使用5 ms掃描速度的實驗中，分析物峰上收集的數據點較少，導致一些分析物的峰形失真，導致CV值變大。因此，更快的MRM掃描速度提高了準確度和穩定性，全新的7500+系統結合自動化的分析軟件提供了更實用高覆蓋靶向組學解決方案。

圖A為1-和2-lysoPC(18:1)的4個采集速度的XIC。如藍色所示，在1.2 ms掃描速度下獲得的數據顯示為異構體的兩個不同的峰。隨著掃描速度的降低，在兩個峰上采集的數據點也隨之減少。在5 ms的掃描速度下(綠色)，兩個不同的峰不再被色譜分辨，于是丟失了脂質異構體的定量信息。

圖B所顯示的上一行的XIC上異構體1-lysoPC(16:0)為主要峰,前面的小峰為異構體2-lysoPC(16:0)。在5 ms的掃描速度下，兩個異構體之間的分離消失了。lysoPC(18:1)也有類似的情況存在（圖B下一行）。在5 ms的掃描速度下，收集的數據點太少，無法確定是否存在異構體。隨著掃描速度的提升，采集點數也隨之提升，于是異構體得以被分辨。同時結果顯示較慢的掃描速度導致分析物CV也顯著更高，會產生顯著的定量誤差。因此使用SCIEX 7500+系統進行快速采集的脂質組學分析提高了脂質異構體的色譜分辨率。

與傳統非靶脂質組學方法相比，靶向脂質組學分析脂質使用簡便、靈敏度高，并且能夠準確地識別和量化脂質，高覆蓋的靶向組學分析被越來越多地監測生物樣品中的代謝和脂質。以上這些結果表明，SCIEX 7500+系統可以提高方法的準確度、穩定性和脂質異構體分辨率，同時增加脂質測定的覆蓋范圍，整體提升高覆蓋靶向脂質組學數據質量。