瑞孚迪 IVIS Lumina LT小動物活體成像——讓二維光學成像更加簡便

IVIS Lumina LT Series III 是 Revvity 第三代小動物活體光學二維成像平臺，具有高靈敏度生物發光和熒光成像性能。該系統配備高靈敏 CCD 相機、避光成像室和全自動化的分析功能。作為的小動物活體成像平臺，IVIS 系統包括一整套全球實驗室認可的實用配件。

靈活、可擴展、可升級

考慮到靈活性，IVIS Lumina LT 是一種多功能系統，可以輕松容納培養皿或微孔板進行體外研究，以及用于器官的離體成像。此外，通過 5 - 12.5 (cm) 可調節視野以及擴展鏡頭，可將視野范圍擴展至 2.5 - 24 (cm)。利用此功能可以對五只小鼠或兩只中等體型大鼠進行同時成像。同時可以進行升級，擁有增強的熒光成像功能，以提高從可見到近紅外成像光譜的靈敏度。

出色的成像效果

IVIS Lumina LT 同時具備高質量的熒光和生物發光成像功能，并且濾光片能用于綠光至近紅外范圍的熒光成像。所有 IVIS 儀器出廠前均經過復雜且嚴格的光學校準，保證在同一實驗條件下，使用不同儀器、不同拍攝參數所獲取的成像數據的一致性及可重復性，方便不同用戶間的數據驗證及交流。此外，Living Image 軟件結合儀器校準、背景扣除和圖像算法，使用戶獲得高質量、可重復性的定量結果。

(1)IVIS Lumina LT 可以提供5個成像視野

圖1 IVIS Lumina LT 成像系統提供5個成像視野

(2)IVIS Lumina LT 可以對同一動物進行多重光學標記成像，如下圖2左是使用酶激活型熒光探針Cat B 680 FAST 用來監測 4T1-luc2 腫瘤模型中組織蛋白酶B的活性，OsteoSense 800 可以靶向骨架結構。圖2右是感染后19h腦膜炎小鼠的體內和離體腦組織者圖像，分別顯示Lux細菌熒光素酶 (500 nm) 和GFAP-Luc 螢火蟲熒光素酶 (620 nm) 信號。大部分細菌信號僅限于腦中腦脊液被困在腦室間隙（背側）或注射部位（腹側）的區域，而GFAP在整個大腦中被誘導且在大腦的某些區域存在不同強度的生物發光信號[1]。

圖2 多重光學標記成像

(3)IVIS Lumina 活體成像在各個領域的應用十分廣泛。在腫瘤分布應用，使用熒光標記方法進行腫瘤定位觀察，人胃腺癌細胞系 BGC823-iRFP細胞的體外細胞形態和增殖能力與 BGC823 細胞相似，第20天，小鼠接種BGC823或BGC823- iRFP后，使用 IVIS Lumina活體成像系統進行觀察。與BGC823細胞相比，BGC823-iRFP細胞在體內和離體均表現出強信號；第18天，腹腔注射BGC823-iRPF小鼠出現明顯信號[2]。

圖3 BGC823-iRFP體外和體內成像

在神經系統的應用，Tau是一種微管相關蛋白，主要在神經元中表達，在神經系統疾病的發病機制中起關鍵作用。通過使用通過基因編輯手段將將GFP的 cDNA整合到 MAPT基因的exon1中（稱為 TauGFP/GFP)，使用Revvity的 IVIS Lumina活體成像系統發現在大腦、睪丸、視神經、坐骨神經和腎臟的熒光強度最大，而在脾臟、肝臟或胃中未觀察到信號[3]。

圖4 TauGFP/GFP小鼠腎臟中GFP的檢測

專業的活體光學成像分析軟件

IVIS Lumina LT 擁有圖像獲取及分析軟件。主要特點包括具有探針庫的成像向導和自動設置功能，便于掃描參數設置及批量處理，以加快數據分析。具有圖像算法工具用于去除組織自發噪音，提高圖像質量及定量準確度。

圖5絕對校準允許長時間的研究以及世界各地實驗室之間的結果比較

強大的硬件配置

IVIS Lumina LT 采用背照射、背部薄化科學1級 CCD 相機可在整個可見至近紅外光譜上提供高量子效率，以熱電方式 (Peltier) 冷卻至 -90 °C，確保了低暗電流和低噪音。具有10個激發濾光片和4個發射濾光片適用于體外、離體及表面成像。以及具有集成的氣體麻醉接口可同時對5只小鼠進行持續麻醉成像。

配套活體成像試劑

Revvity 提供種類豐富的生物發光底物、生物發光腫瘤細胞株和發光細菌、熒光探針、熒光探針標記及納米粒子標記試劑等活體成像相關試劑，可以幫助研究人員更好地了解疾病相關早期生物學變化、跟蹤疾病進展、幫助指導藥物發現過程以及評估候選藥物的功效和安全性。

圖6 不同活體成像試劑成像結果

綜上，Revvity IVIS Lumina LT小動物活體成像可以實現高靈敏度生物發光二維成像、覆蓋至近紅外光譜波段范圍的熒光成像、基于切倫科夫輻射原理的放射性同位素成像，是市場上信賴的小動物活體光學成像系統。同時Revvity具有三維成像儀器、熒光探針、標簽、染料等試劑，可為您提供全面的體內解決方案。

參考文獻

[1] Kadurugamuwa JL, Modi K, Coquoz O, Rice B, Smith S, Contag PR, Purchio T. Reduction of astrogliosis by early treatment of pneumococcal meningitis measured by simultaneous imaging, in vivo, of the pathogen and host response. Infect Immun. 2005 Dec;73(12):7836-43. doi: 10.1128/IAI.73.12.7836-7843.2005. PMID: 16299273; PMCID: PMC1307043.

[2] Hu H, Zhang Z, Wang R, Wang Y, Jin J, Cai L, Yang J, Duan H, Wu Z, Fang Z, Liu B. BGC823 Cell Line with the Stable Expression of iRFP720 Retains Its Primary Properties with Promising Fluorescence Imaging Ability. DNA Cell Biol. 2020 May;39(5):900-908. doi: 10.1089/dna.2019.5057. Epub 2020 Feb 25. PMID: 32096664.

[3] Vallés-Saiz L, Peinado-Cahuchola R, ávila J, Hernández F. Microtubule-associated protein tau in murine kidney: role in podocyte architecture. Cell Mol Life Sci. 2022 Jan 27;79(2):97. doi: 10.1007/s00018-021-04106-z. PMID: 35084555; PMCID: PMC8794918.